球孢白僵菌几丁酶基因Bbchit1抗病作用研究.pdf

中文摘要 球孢白僵菌几丁质酶基因Bbchitl 抗病作用研究 作物遗传育种专业硕士研究生郭绍辉 指导教师裴炎教授 中文摘要 几丁质酶(cbitinase)是一类催化水解N．乙酰葡萄糖氨聚合物中B．1’4糖苷键的酶。几丁 质酶能有效降解大多数真菌细胞壁的重要组分之一的几丁质，因此，几丁质酶的抗菌作用备 受人们关注，前人的研究也表明超量表达几丁质酶基因能提高植物对病原菌的抗性。本研究 以毕赤酵母为表达系统，制备丝状真菌球孢白僵菌(Beauveriabassiana)几丁质酶BbchitI， 研究了Bbchitl对部分植物病原真菌孢子萌发和菌丝生长的抑制作用。同时通过根癌农杆菌介 导将Bbchitl基因转入受体植物烟草(Nieotianatabacum)中，研究了转基因烟草的抗病性。 ’ 主要结果如下： l、检测了毕赤酵母表达获得的几丁质酶Bbehitl对部分植物病原真菌孢子萌发和菌丝生 cinema)、油菜菌核病菌 长的抑制作用。结果表明：Bbehitl能抑制黄瓜灰霉病菌(Botrytis (Sclerotinia selerotiorum)、玉米小斑病菌(Bipolaris brassicae)、柑橘绿霉(Penicillium alternata)、白菜黑斑病菌(Altenaria (Verlicilliumdahliae)、柑橘绿霉菌(Penicillium digitatum)孢子的萌发有抑制作用， Bbchitl基因已整合到烟草基因组中，并稳定遗传。几丁质酶活性测定结果表明：5个T2代烟 blot分析也表明，Bbchitl基因在转基因烟草中能稳定表达目标蛋白。 3、对5个T2代烟草纯合株系进行了抗病性检测，结果表明：5个T2代烟草纯合株系(Bb35、 烟草赤星病、烟草青枯病的抗性均有不同程度的提高。 关键词：球孢白僵菌几丁质酶烟草赤星病烟草青枯病抗病性 ABSTRACT The resistanceofan phytopathgon the gene(Bbchitl)from bassiana fungi，Beauveria Candidate： GuoShaohui Advisor：Prof．PeiYan Abstract Chitiaaseisa of which the bondsof groupe,llgynlescatalyzehydrolysis of}I，#,-glycosidic cbitin,animportant of cell has componentmanyfungalwall．wi恤the∞6fhngal activity,ehitinase attracteda lotofeffortstoenhanceresistanceto thiskindof plant pathogensbyoverexpressing