梨茎尖和叶片高离体繁殖再生体系建立.pdf

lIIIr l I rillI I I IIIII UI ＼1735166 资助内容。 中文摘要 建立稳定、高效的叶片不定梢再生体系是梨转基因成功的关键环节。为此本试验 以梨离体芽苞作外植体，在初代培养诱导试管苗成功的基础上，分别以MS、AS和 1／2MS培养基为基本培养基，附加不同的激素组合，根据培养基配方及培养条件， 通过正交试验设计并结合方差分析和多重比较，研究不同培养基对梨试管苗芽增殖影 响；叶片愈伤组织的诱导及愈伤组织的分化和试管苗生根的影响。 试验研究获得的主要结果如下： 1、外植体消毒及初代培养 将外植体用75％酒精处理10 min时，取得最佳消 s后再用0．1％HgCl2消毒4 MS+6-BAO．5 0．2 毒效果。外植体芽诱导的适宜培养基为1／2 mg／L+NAAmg／L。 2、增殖培养 ． 鸭梨茎段增殖的适宜培养培养条件是以1／2MS为基本培养基，附加0．8 mg／L O．3 的6-BA； mg／L的IBA及0．5mg／L的GA3，增殖倍数为3．83；黄冠梨茎段 增殖的适宜培养条件是以AS为基本培养基，附加0．8 mg／L的6．BA；O．1mg／L的 IBA及0．5 mg／L的GA3，增殖倍数为3．56；基本培养基对梨茎段增殖和生长无显 著影响；不同浓度的6．BA处理，差异达到了显著水平。 3、愈伤组织的诱导与再生 试验从两个梨品种叶片上再生出不定芽，建立起黄冠和鸭梨叶片再生不定芽体 系。叶片离体培养以1／2MS培养基为基本培养基，附加不同浓度TDZ和IBA，结 果以1／2MS附加2．5 mg／L的TDZ及O．5mg／L的IBA适宜鸭梨叶片诱导愈伤及 分化的培养基组合；以1／2MS附加0．5 mg／L的TDZ及0．5mg／L的IBA为适宜 黄冠叶片诱导愈伤组织及分化的培养基组合：在适宜条件下，鸭梨和黄冠叶片再生频 率达到65．28％和66．67％，平均再生芽数为4．78和3．17。 4、梨苗生根 MS+1．0 以1／2 mg／LIBA的培养基诱导鸭梨和黄冠的生根效果稍好，生根数、 根长，统计均显著高于其他处理。 关键词：梨；茎尖；初代培养；增殖培养；叶片；再生；生根培养； Abstract Establish leavesShoot is stable，efficient regenerationsystempeartransgenie stem or takenfromshootof were successfullink．111e explants pear key segmentapex testedinvitroculturetoestablish effectofdifferent by highregenerationsystem．nle