农杆菌介导番茄CMV-dMP基因研究.pdf

李爱民：农杆菌介导番茄转CMV-dMP基因研究 摘 要 黄瓜花叶病毒病是影响番茄产量的重要病害，发病时可造成番茄严重减产。 药剂、疫苗等均起不到有效的防治作用。抗病育种是最经济、有效的防治方法。 由于番茄品种资源中还没有发现抗黄瓜花叶病毒病的抗源，传统的育种方法很 难见效。植物基因工程为番茄抗黄瓜花叶病毒病育种开辟了新的途径。本研究 利用农杆菌介导技术将黄瓜花叶病毒病缺失的运动蛋白基因导入番茄，创造了 番茄抗黄瓜花叶病毒病新种质。 (1)利用农杆菌介导技术，将黄瓜花叶病毒病缺失的运动蛋白基因K130 导入到番茄新品系沪番1479中，获得了一批转基因植株。为番茄抗黄瓜花叶病 毒病育种提供了新的种质。 (2)分析了抗生素浓度、受体基因型、受体类型对转化过程的影响，认为： 转化体系中卡那霉素浓度在100mg／L时，对转化体是较为安全的选择压力，羧 苄青霉素的浓度在750 mg／L以下时，对外植体生长影响不大，试验过程中根据 农杆菌增殖情况适度调节；受体基因型是影响番茄转化效率的重要因素，转化 前应对受体基因型进行选择，本试验中筛选出一个适合快繁和高效转化的基因 型沪番1479，目前正对该材料申请快繁专利；对受体类型的分析比较，发现番 茄的子叶比下胚轴具有更好的转化效率。 (3)通过对转基因植株种子抗卡那霉素出苗试验、过氧化物同工酶酶谱分 析及转基因植株抗病性分析，证明目的基因已整合到沪番1479的基因组中。 关键词：农杆菌介导，基因转化，黄瓜花叶病毒病，运动蛋白，外植体 ——一一一 堑型盔兰塑±堂垡丝兰 旦 Abstract Cucumber mosaic an virustotomato virus(CMV)iS important whichcan causeseriouslost．Theandthe vaccineare yield drug not SU瞄cient controlthe disease．Virus enough resistance isthe breeding mostecononomical anderiective of method．Becausethe controlling lackofCMVresistancein genetomao。traditional plantbreedingways cannotbeefficient．Plant anew for geneticengineering providesway tomato’SCMV resistance this wehave