三种RNA病毒卵黄抗体的检测及制备.pdf

三种RNA病毒鸡卵黄抗体的检测及制备 摘 要 作为免疫检测诊断试剂奠定基础，同时IgY还可用于被动免疫和疾病的防治。 仍可产生高效价卵黄抗体。 三种IgY的产生进程曲线相似，即在二免后卵黄中IgY效价开始I：升， 第四次免疫后，效价达到最高并维持三个月。每次加强免疫后第2、3天，由 于抗原中和作用IgY效价持平或略有降低，而后增加。 gg／mL及3．2 被酶标板，BSA封闭，加入待测液及l：400稀释的酶标二抗，TMB显色， 选用水稀释一微滤法去脂，优化后的条件如下：卵黄用7倍水稀释，醋酸 I 醋酸纤维酯膜微过滤，获得WSF。 NaClTris—HCI DEAE--SephadexA50离子交换色谱纯化IgY。用0．20mol／L NaCl THB可一步洗脱纯化WSF为电泳 缓冲液(pH6．5)平衡上样，0．5mol／L 纯IgY。通过以上方案IgV总回收率57．8％。 法和免疫程序，获得r高效价免疫蛋。其中抗RV的IgY国内尚未见报导。通 过分离纯化得到了电泳纯IgY。该方案条件温和，抗体活性损失小。所得IgY 可进一步用于相应传染病的诊断检测和防治应用研究。 卵黄抗体(IgY)，酶联免疫吸附检测(ELISA)，离子交换色谱 Il DETECTION AND PREPARATIONOFEGG．YOLK ANTIBODY SPECIFICTO THE THREE RNA VIRUSES ABSTRACT Theimmunization ofchickenswiththreeRNA and viruses(RV,HRVIBDV) whichareall causedserious infectiousdiseaseshas pathogens been and practiced the as generation wellas rules，detection(especiallyELISA)，isolationpurification of hasbeen ofthe threevirus needed IgY developed．Detectionspecific usingIgY luther study． Theimmunizationsasfollows：The chickens