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三个小麦新品种醇溶蛋白基因序列分析 研究生：刘千 指导老师：郑有良教授 摘 要 本文根据已报道的小麦小、p和∞．醇溶蛋白基因保守区序列，分别设计特 异引物，采用PCR克隆的方法，对小麦新品种“川农16”、“良麦2号”和“良 麦3号”的相应序列进行克隆测序与分析，其主要结果如下： 1．从3个供试材料中克隆到11条不同的a-醇溶蛋白基因序列。其中从“川农 典型的a-醇溶蛋白基因结构，其重复区开头可分出5个氨基酸残基的N·末端， 根据密码子可推导出较为一致的重复单元PF／YPQPQ，重复区主要差异在于 重复单元PFPQPQL在不同基因出现频率不同。所有序列的两个多聚谷氨酰 胺区除谷氨酰胺外还有其余氨基酸出现，密码子大多是第1个碱基的替换。 在特征区6个保守的半胱氨酸残基中，a-CNl6-6的第4个半胱氨酸残基被精 n的前端均有额外的半胱氨酸残基代替了原来的丝氨酸(s)，使半胱氨酸残 基数变为奇数。相对其它两个品种，“川农16”中所得序列出现多余半胱氨 酸的频率较高，表现出独特性。 2．从“川农16”中克隆到6条不同的p醇溶蛋白基因序列，分别命名为7．-CNl6-1、 提前终止密码子，均为假基因。序列分析表明，5’旁侧序列上有一致的几个 “TATA”元件，3’旁侧序列有一个可能的多聚腺嘌呤信号，在基因编码区具 有典型Y．醇溶蛋白基因的结构特征，重复区可划分出较为一致的重复单元 PFPQl．2(PQQ)1-2，且重复单元长度变化较大。在多聚谷氨酰胺区各序列长度 差异也较大。序列)，-CNl6-3在重复区有1个多余半胱氨酸残基，使半胱氨 酸总数变为奇数，而其它序列只有8个保守的半胱氨酸残基。序列比对可以 看出，所得序列与小麦属各物种T．醇溶蛋白基因的相似性较高，而与来源于 黑麦y-secalin基因的相似性只有50％左右。 有提前终止密码子，∞一CNl6-60发生了移码突变。从“良麦2号”获得1条 基因和基因片段都属m-2型，其重复区的脯氨酸含量约30％，谷氨酰胺含量 超过40％，其中基因co-LM2．7谷氨酰胺含量高达44．8％。序列重复单元长短 不一，氨基酸变化丰富，但都有较为一致的重复单元PFPQl-2(PQQ)1．2以不同 频率连续出现。序列均没有可形成分子内或分子间二硫键的半胱氨酸残基。 进一步序列比对表明，它们与来源于普通小麦和山羊草的0卜醇溶蛋白基因相 相似性也达到70％。 关键词：小麦；新品种；醇溶蛋白；川农16：良麦2号；良麦3号；基因克隆 II ofGliadinGenesfromThreeNewWheatVarieties SequenceAnalysis 。 Abstract totheconserved According regions genesequences，the of洳，p，and∞·gliadin were to thefull from gene-specificprimersdesignedamplify genecodingregions three newwheat 2and 3．The varieties，includingChuannong16，LiangmalLiangmai as PCR were resultswere amplyfiedfragmentssequenced,andinve