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氯苯甲酸降解菌分离筛选及降解特性研究
中文摘要 氯苯甲酸(CBA)作为一种重要的氯代有机化合物,广泛应用于工农业 生产,其在环境中的残留和危害也是不容忽视的。因此研究CBA的生物 降解特性,具有理论和应用价值。论文的主要研究内容如下: (1)比较了两个采自原始生境的土壤样品及处理氯代烃的活性污泥样品中 含有的降解单氯苯甲酸的微生物数量。结果表明微生物降解CBA的能力 具有广泛性并对不同取代氯苯甲酸降解有一定差异。· (2)从活性污泥中分离得到7株以3.cBA为唯一碳源生长的细菌。经鉴定 3株为假单孢菌,其余4株为红球菌、节杆菌、产碱菌、伯克霍尔德氏菌。 其中红球菌的降解能力明显高于其它菌,因此以该菌(命名为S一7)为出发 菌株。通过形态学、生理生化反应以及16SrRNA基因序列测定,确定S 一7为红平红球菌。 .. 这是首次报道红平红球菌在l00c低温条件下完全降解3.CBA。该菌广泛 的温度适应性对于低温区域的生物修复有重要的意义。 (4)质粒提取和消除实验表明菌株S一7降解3.CBA的基因位于染色体上。 在细胞破碎液中测定了(氯)邻苯二酚l,2.双加氧酶的活力而没有检测到 2,3.双加氧酶的活性。HPLC检测到氯邻苯二酚的存在。全波长扫描发现 产生了与氯.顺,顺.粘糠酸一样的紫外光谱。推断出菌株降解3.CBA途径: 3.CBA首先转化为氯邻苯二酚,通过修饰邻位裂解途径降解氯邻苯二酚, 形成的产物进入三羧酸循环。 ‘ (5)研究了在以葡萄糖为生长基质的条件下,菌株对2.CBA和4.CBA的降 解能力。S一7可共代谢2.CBA,但是不能共代谢降解4.CBA。蛋白质电 泳结果表明,葡萄糖为生长底物时,2.CBA的降解酶是由2.CBA本身所 诱导,它们不同于细菌利用葡萄糖的酶。 (6)单独使用海藻酸钠或聚乙烯醇(PvA)为载体固定化菌株s一7时,不能 形成稳定的微球。将海藻酸钠和聚乙烯醇混合使用可提高固定化微球的效 果。海藻酸钠中加入壳聚糖后,固定化微球的性能有所提高,但降解3.CBA 的效果并没有明显改善。 关键词:生物降解氯苯甲酸红球菌降解机理共代谢固定化 ABSTRACT chlorinatedaromatic Chlorobenzoates(CBAs),asimportant compounds, andriskof were usedin and residue widely agricultureindustry.However,the cannotbe the CBAin environment Study degradation neglected. theoreticaland detailed characteristicsexhibit importance.The application workofthisthesisisasfollows: and of 4一CBA intwo soils 2.,3.,and degraderspristine (1)Thediversity thatthe contaminated
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