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DNA的重组与转座培训课程

◎转座子转座的特征 ☆ 转座不依赖靶序列的同源性 ☆ 转座后靶序列重复 ☆ 转座子的插入具有专一性 ☆ 转座具有排他性 ☆ 转座具有极性效应 ☆ 活化临近的沉默基因 ☆ 区域性优化 第四节逆转录转座子(自学) 复制型转座 在复制型转座中,整个转座子被复制了,一个拷贝保留在供体的原来部位不变,另一个拷贝即原转座子的拷贝则插入到受体的位点上,供体和受体都有一个转座子的拷贝,所以,通过转座转座子的拷贝数得到了扩增。转座酶和解离酶在转座过程中分别作用于原始转座子和复制转座子。 非复制型转座 在非复制型转座中,转座子可以直接地从供体的一个位点转移到受体的新位点处,此类转座子的特点是两端具有20bp左右的反向重复序列,特异的转座酶附着于此而使转座子切离下来,整合到另一个位点上。供体在切离后留下的缺口被衔接起来,但往往在衔接处的序列发生改变而产生突变。 ◎DNA转座引起的遗传学效应 ☆可导致突变; ☆出现新基因; ☆影响插入部位邻近基因的表达,改变宿主表型; ☆引起染色体畸变。 40年代,Barbara McClintock, 研究发现:玉米籽粒有色(红、紫),但有一些籽粒出现花斑及条纹,花斑有大有小。早期有颜色者,花斑大,后期有色者,花斑很小. 控制元件,可以在基因组内转移,并能改变基因的活性引起功能的改变. ◎真核生物的转座子 玉米的控制因子 果蝇的转座元件 自学 ◆玉米的控制原件 Ac-Ds控制系统 Ac (autonomous element),即自主控制因子: 含有2个转座酶基因、3个非编码区,两端有11bpIR。Ac可自主转座,能使Ds因子活化,通过Ds控制结构基因的表达。 Ds (noautonomous element),又称解离因子: Ac能活化Ds,使其在基因组内转座或插入结构基因之内。玉米Ds存在能抑制邻近基因的表达。 C Ds C Ds Ac C Ds Ac Ds 显色基因 不显色 显色 As Ac Ac-Ds 系统对玉米颜色的的控制 有色基因C (显性)可使籽粒有色,C旁Ds抑制了基因C的作用,使籽粒无色; 当Ds从C上移走后,C作用恢复,出现颜色; Ds从C上移走的早,花斑就大,反之就小;因此花斑的大小是Ds从C上移走的早晚引起的。 Ds的移动还受另一个因子(Ac)的控制,当Ac存在时,Ds可移动,Ac丢失,则Ds不能移动。 作业 1 DNA的重组概念﹑类型及意义 2 简述Holliday重组模型 ◆果蝇中的P因子 “ 杂种不育”(hybrid dysgenesis)。 P 型(父本贡献的,paternal contributing) M 型(母本贡献的,maternal contributing) M(♂)×P(♀) 后代不育 P(♂)×M(♀) 后代可育 * 一节 DNA重组 同源重组 特异位点重组 二节 DNA转座 转座子的概念 转座子的分类 转座过程发生和机制 转座子转座的特征 真核生物的转座因子 第六章 DNA的重组与转座 重组和突变是产生遗传变异的两大主要因素,但二者的分子机制截然不同:重组是已经存在的遗传信息发生重排,而突变是改变基因组中的碱基。但二者在分子机制上又是相互影响的。 一 概念 DNA 分子内或分子间发生遗传信息的重新组合称为DNA的重组(遗传重组或基因重排)。 第一节 DNA的重组 二 DNA重组的意义 对生物进化起着关键作用。能迅速增加群体的遗传多样性(diversity),使有利突变与不利突变分开,通过优化组合积累有意义的遗传信息;提供修复机制;调节基因表达等。 三 重组主要类型 1 同源重组 2 特异位点重组 3 异常重组 其共同点是双股DNA间的物质交换,但发生的情况不同。 1 同源重组 ◎发生在同源序列间的重组称为同源重组(homologous recombination),又称基本重组。 是最基本的DNA重组方式,通过链的断裂和再连接,在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片段的交换。 ◎ Holliday重组模型 Robin Holliday于1964年提出了重组的杂合DNA模型,又称Holliday模型。该模型对重组过程的解释如下: 同源的非姐妹染色单体联会; 同

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