微生物检验国家新标准.DOCVIP

GB/T 4789.1—1994 食品卫生微生物学检验　总则 　　1　主题内容与适用范围　　本标准规定了食品卫生微生物学检验总则。　　本标准适用于样品的采样、送检、检验及报告。　　2　引用标准　　　　GB 4789.23　食品卫生微生物学检验　冷食菜、豆制品检验　　3　设备和材料　　探子、铲子、匙、采样器、试管、广口瓶、剪子、开罐器等。　　4　样品的采集　　在食品检验中，所采集的样品必须有代表性。食品因其加工批号、原料情况(来源、种类、地区、季节等)、加工方法、运输、保藏条件、销售中的各个环节(例如有无防蝇、防污染、防蟑螂及防鼠等设备)及销售人员的责任心和卫生认识水平等无不影响着食品卫生质量，因此必须考虑周密。　　4.1　样品种类　　样品种类可分为大样、中样、小样三种。大样系指一整批，中样是从样品各部分取得的混合样品，小样系指做分析用，称为检样。检样一般以25g为准，中样以200g为准。　　4.2　采样方法　　4.2.1　采样必须在无菌操作下进行。　　4.2.2　采样用具：如探子、铲子、匙、采样器、试管、广口瓶、剪子和开罐器等，必须是灭菌的。　　4.2.3　根据样品种类如袋、瓶和罐装者，应取完整的未开封的。如果样品很大，则需用无菌采样器取样；样品是固体粉末，应边取边混合；样品是液体的，通过振摇即可混匀；检样是冷冻食品，应保持在冷冻状态(可放在冰内、冰箱的冰盒内或低温冰箱内保存)，非冷冻食品需保持在0～5℃中保存。　　4.3　采样数量　　根据不同种类，采样数量有所不同，见下表。　　各种样品采样数量　　（图略）　　续表　　（图略）　　4.4　采样标签　　采样前或后应立即贴上标签，每件样品必须标记清楚(如品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样年、月、日)。　　5　送检　　5.1　样品送到食品卫生微生物检验室应越快越好，一般应不超过3h。如果路途遥远，可将不需冷冻样品保持在1～5℃环境中(如冰壶)。如需保持冷冻状态，则需保存在泡沫塑料隔热箱内(箱内有干冰可维持在0℃以下)。　　5.2　送检时，必须认真填写申请单，以供检验人员参考。　　6　检验　　6.1　食品卫生微生物检验室接到送检申请单，应立即登记，填写实验序号，并按检验要求，立即将样品放在冰箱或冰盒中，积极准备条件进行检验。　　6.2　各食品卫生微生物检验室必须备有专用冰箱存放样品。一般阳性样品，发出报告后3d(特殊情况可适当延长)始能处理样品。进口食品的阳性样品，需保存6个月，方能处理。阴性样品可及时处理。　　7　报告　　检验完后，检验人员应及时填写报告单，签名后，送主管人员核实签字，加盖单位印章，以示生效，立即交食品卫生监督人员处理。 食品卫生微生物学检验　菌落总数测定 　　1　主题内容与适用范围　　本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。　　本标准适用于食品中菌落总数的测定。　　2　术语　　菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后(如培基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等)，所得1mL(g)检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。　　菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。　　3　引用标准　　GB 4789.28　食品卫生微生物学检验　染色法、培养基和试剂　　4　设备和材料　　4.1　温箱：36±1℃。　　4.2　冰箱：0～4℃。　　4.3　恒温水浴：46±1℃。　　4.4　天平。　　4.5　电炉　　4.6　吸管。　　4.7　广口瓶或三角瓶：容量为500mL。　　4.8　玻璃珠：直径约5mm。　　4.9　平皿：直径为90mm。　　4.10　试管。　　4.11　放大镜。　　4.12　菌落计数器。　　4.13　酒精灯。　　4.14　均质器或乳钵。　　4.15　试管架。　　4.16　灭菌刀或剪子。　　4.17　灭菌镊子。　　5　培养基和试剂　　5.1　营养琼脂培养基：按GB 4789.28中4.7规定。　　5.2　磷酸盐缓冲稀释液：按GB 4789.28中3.22规定。　　5.3　生理盐水。　　5.4　75%乙醇。　　6　检验程序　　菌落总数的检验程序如下。　　　　7　操作步骤　　7.1　检样稀释及培养　　7.1.1　以无菌操作，将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。　　固体检样在加入稀释液后，最好置均质器中以8000～10 000r/min的速度处理1m