广东地区HBV基因型在家庭聚集感染中的分布及意义.pdf

广东地BHBV堆|太|犁n尔庭聚集感染中的分南^乏心义 中上摘螫 有少量研究表明HBV基因型与HBV传播途径存在相关性。 多数研究表明感染不同的HBV基因型可引起不同的临床表现。欧洲的学者发 现，A型更多见于慢性肝病，D型更多引起急性肝炎。来自印度的报道显示D型 与更严重的肝病相关，并日丁能预测年轻患者liCe的发生。由于慢性乙型肝炎在亚 洲发病率最高，B型及C型在亚洲地区分稚最为广泛，因此有大量的关于B型及 DNA C型的研究报道。来自中国及日本的多数研究表明C型HBeAg阳性率、HBV 载量均较B型更高，常出现更为严重的肝损害，与中老年人的原发性肝细胞癌 (HcC)相关。在台湾的多项研究中发现，该地区的HBV相关性的HCC患者多为 B型，B型多见于年轻人甚至是儿童发生的HcC，其中90％在35岁以下。 慢性乙型肝炎抗病毒(包括拉米夫定及干扰素)治疗的应答在不同基因型间 是存在一定差异的。尽管目前报道不完全一致，多数研究均认为，A基因型及B 基因型对干扰素的应答率较c型及D型更高：在拉米夫定使用1年以上时，产生 耐药的风险在各基因型别之间无显著差异。有关各基因型对阿德福韦酯应答的差 异尚未发现。 目前HBV基因分型的方法有多种。其中基因测序法是基因分型的金标准，另 探针检测法、分子杂交法(INNO-LIPA)及多重PCR法等方法。 我科处在IiBV感染的高发地区，HBV感染就诊人数多。寻找并建立一种简便 且敏感度、稳定性、特异性均较强并能够临床常规应用的HBV基因分型法，对于 指导评估患者预后、尤其是辅助选择抗病毒治疗具有重要的意义。 2．研究目的 本研究旨在建立一种敏感、稳定的HBV基因分型法，以探讨其在临床常规应 用中的可能性。并通过检测HBV基因型在广东地区家庭聚集感染中的分布，探讨 基因型在家庭聚集感染的流行病学尤其是传播途径方面的意义。 3．材料与方法 3．I研究对象 Ⅱ 广东地区HBV摹闲型臼：家庭聚集感染中的分布及直义 中文摘要 为来自广东地区的179例在中山大学第三附属医院感染科就诊轻中度慢性 肝炎病人和携带者。研究组所有病例均为家庭聚集感染的病例，即同一家族中感 染HBV的人数／2个，为HBsAg(+)和HBVDNA(+)的慢性HBV感染者，且家庭聚 集感染的病例中父母代发现HBV感染时间早于子代． 分组 研究组分为I组和Ⅱ组，I组为父母代与子女代感染组，再分为母子组和父 子组。母子组为母代与子女感染组；父子组为父代与子女感染组。lI组为家庭内 其他成员感染组。对照组中所有病例均为在本科门诊收集的未发现有HBV感染家 族史的病人。 3．2实验方法 HBV 3．2．1 DNA定量检测 采用广州达安基因生物公司生产的乙型肝炎病毒核酸扩增荧光定量检测试 剂盒。具体方法参照说明书． 3．2．2乙肝两对半检测 采用美国Abbott公司的HBsAg、Anti—HBs试剂盒。 3．2．3基因分型法 采用型特异性引物巢式PCR法。首先使用热裂解法进行HBvDNA提取，然后 使用一对外引物迸行第一轮扩增，再以第一轮PCR产物为模板，并分别以A组 引物和B组引物为内引物进行第二轮扩增，将得到的产物进行凝胶电泳，根据产 物片段大小判断基因型。 3．2．4验证实验(II州O-LiPA法) HBV 和INN0一LIPAGenotyping试剂盒。对24份已经本实验方法鉴定基因型的 血清标本进行基因型的检测。 3．3统计学方法 Ⅱl 广东地BHBV堪Ⅲ掣“永庭聚囊感染中的分布腱童义 中卫摘螫 将179份样本的资料及数据输入计算机，数据用’i．+s或中位数(肋表示，对 各组样本的各种基因型进行卡方．枪验，并对各HBV基因型的DNA定量及各组样本 的年龄、诊断等指标进行独立样本成组r检验。P0．05为差异有显著性。所 13．0f