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用于动物细胞培养的发酵罐的工艺技术简介动物细胞发酵罐是实现动物细胞大规模培养的枢纽与核心设备，为细胞生长提供相宜的环境，关系到细胞培养的质量和产量，因而在动物细胞大规模培养技术研究中据有举足轻重的地位，对于实现产业规模化高效出产具有重大意义。根据动物细胞的培养特性，具务低的剪切，较好的传递效果和液体力学性质是这类发酵罐设计或改进所必需遵循的原则。??两种重要的动物细胞培养发酵罐：? ?? 1、搅拌式发酵罐? 搅拌式发酵罐靠搅拌浆提供相搅拌的动力，它有较大操纵范围、良好的混合性和浓度平均性，因此在生物反应中被广泛应用。动物细胞培养中的搅拌式发酵罐都是经由改进的，包括改进供氧方式、搅拌浆的形式及在发酵罐内加装辅件等。各种动物细胞培养搅拌式发酵罐的主要区别在于搅拌器的结构。这些搅拌器外形主要有棒形、气桨叶形、圆筒形，搅拌方式主要有表面搅拌、深层搅拌、气流搅拌；动力来源为磁力或是电念头驱动。??2、气升式发酵罐? 气升式发酵罐也是实现动物细胞高密度培养的常用设备之一，尤其合用于培养切变敏感的细胞。气升式发酵罐与搅拌式发酵罐比拟，产生的湍动温顺而平均，剪切力相称小，器内没有机械运动部件，因而细胞操纵率比较低；直接喷射空气供氧，氧传递速率高；液体轮回量大，使细胞和营养成分能平均分布于培养基中。在5L/30L通气搅拌发酵罐中，培养细胞时，我想通过检测葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺、及氨离子浓度，有那些离线的检测方法或者仪器，经济性如何？大家在做大规模培养时，都检测那些参数。在网上我查过山东科学院生物研究所的SBA-40型生物传感分析仪，它可以测定葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺，大家有不有谁用过，精度如何？能不能达到0.1g/L，细胞培养基对结果的影响。 /technicserve3_1.htm另外希望做规模培养的朋友多多交流！QQ123955145，MSN：hnwhy@163.com细胞培养用生物反应器近十年来，基因工程重组有机体的产业化进程推动了现代生物技术用生物反应器的迅速发展，根据生物安全有关法规的规定，处理大于10L容积料液的操作均属于大规模的范围，这一类生物反应器的特点是规模很小、结构精密、控制严格。对于工程菌的培养，可以采用小型的机械搅拌式发酵罐，而针对动物细胞、植物细胞的培养，已经开发了许多不同类型的新型生物反应器，主要有： 1．2．l动物细胞培养用生物反应器 1．2．1．1通气搅拌式 这类反应器是在原有小型通气搅拌发酵罐基础上发展起来的培养装置，针对动物细胞易受机械损伤的特点，采用剪切应力小、混合性能好的搅拌器，其中以NBS公司笼式搅拌器效果最好，主要组件为中空轴带动旋转的笼式搅拌器构成的通气腔和消泡腔，分别通过200目不锈钢丝网进行气液交换和消除泡沫，搅拌器以30－60RPM的低速旋转，其产品型号有1．5L至5L的CelliGen以及15L至1000L的Microlift两大系列，占有世界动物细胞培养反应器的大部分市场。国内在前者的基础上研制成功20L规模的CellGul-20，设有双层笼式搅拌器，扩大丝网更换面积，提高氧传送系数，也可提供订货。其他类似的结构有MBK－Sulzer公司的产品，以多孔硅胶管通气，并以旋转的不锈钢丝网进行混合；其他尚有Bioengineering公司的产品也是后起之秀，有多种规格可以订货。所有这些都能满足微载体系统培养动物细胞的需要。 1．2．1．2中空纤维管式 这类主要用于单抗生产的反应器的进展趋势是：从纵向布置纤维管的装置型式向纤维管横向布置形成平板式的浅床结构的方向发展。床层深度通过纤维管的层数控制，安放在底部和顶部都设有2～3微米的微孔不锈钢烧结板的矩形容器内，培养基由下面进入，细胞则在纤维管中生长，可以分批培养悬浮生长的细胞，亦可培养贴壁依赖性的细胞。首先开发成功的这种反应器的Endotronics公司，近年的改进是在反应器的筒体外部加设一膨胀室，用管道与筒体连接，以改善水力学条件，可缩小培养基的浓度梯度，减少细胞培养微环境的差异，获得更高的细胞浓度。均已应用于单抗的大规模生产。 1．2．1．3气升式 这类气升式反应器以内循环式为主。器内设置环型管作为气体喷射器，以0.0L~0.06vvm的空气比进行通气，通过导流筒循环，剪切力比较小，氧传递速率较高，液体循环量大。Celltech公司首先采用这类反应器进行杂交瘤细胞的悬浮培养生产单克隆抗体，这类反应器的技术关键在于自动控制和细胞培养。其溶氧的控制系通过空气流速调节，而pH的控制则通过通入二氧化碳进行调节。根据细胞的倍增时间和细胞密度，从10L的细胞逐级移种到1000L培养，需要400h的培养周期，可生产单抗100g。这类罐的罐体规模从1980年的10L规模，已经逐步发展放大到1990年的10，000L。其他