白蛋白结合chiff碱金属配合物的制备及抗氧化活性.pdfVIP

摘 要 寻找高效、低毒、廉价的抗氧化剂是生物，化学，医学等领域的重要研究课 题之一。希夫碱及其衍生物与过渡金属离子所形成的配合物具有抗氧化等生物活 性，已经引起了人们的重视，但是其一些缺点限制了进一步的应用。血清白蛋白 是血浆中含量最丰富的重要载体蛋白，能与许多内源性和外源性物质、也能同难 溶于水的物质广泛结合。本文在对氧自由基、抗氧化剂主要类别及主要代表物质 进行综述的基础上，采用混合溶剂法制备了牛血清白蛋白（BSA ）结合 Schiff 碱 金属配合物，并对其抗羟基自由基活性进行了研究，以找到最佳的抗氧化剂。为 寻找、设计新型的抗氧化剂，丰富抗氧化剂种类提供依据。 第一，首次采用混合溶剂法制备了牛血清白蛋白结合Salphen型Schiff碱金属 配合物（BSA-HOSalphenM ，M=Co, Mn ），并采用圆二色谱（CD ）和聚丙烯酰 胺凝胶电泳（PAGE ）进行了表征，发现HOSalphenCo ：BSA 的结合比例低于10 时Schiff碱金属配合物的加入对BSA 的结构影响较小。采用邻二氮菲-Fe2+氧化法 对BSA-HOSalphenCo 的抗氧化活性进行了研究，发现BSA-HOSalphenCo系列化 合物具有优异的清除自由基的活性。其中，当结合越多HOSalphenCo 时， BSA-HOSalphenCo系列化合物的清除羟基自由基的活性越高。结合对BSA结构影 响的考虑，认为BSA-HOSalphenCo-10是这个体系中最佳的抗氧化剂，其EC50数 值是15.2 μmol/L ，远大于传统抗氧化剂VC 的EC50值，即BSA-HOSalphenCo-10具 有优异的抗氧化活性。并对可能的抗氧化机理进行了探讨。 第二，制备了白蛋白结合Salen型Schiff碱金属配合物（BSA-HOSalenM ， M=Co ，Mn ，Zn ），并研究了其抗羟基自由基活性，发现：HOSalenCo ：BSA 的 结合比例低于 10 时Schiff 碱金属配合物的加入对BSA 的结构影响较小； BSA-HOSalenCo化合物具有优异的清除自由基的活性。其中，结合HOSalenCo 越多的化合物其清除羟基自由基的活性越高，其中BSA-HOSalenCo-10 的EC50数 值是54.0 μmol/L 。 第三，制备了白蛋白结合N-4- 羟基水杨醛缩苯丙氨酸Schiff碱金属配合物 （BSA-HOSalpheM ，M=Co ，Mn ，Zn ，Fe ，Cu ），并研究了其抗羟基自由基活性， 发现：HOSalpheM ：BSA 的结合比例低于10时Schiff碱金属配合物的加入对BSA 的结构影响较小；不同金属其抗氧化活性不同，其中金属Fe表现出了突出的抗氧 化活性。BSA-HOSalpheFe-10是系列化合物中最佳的抗氧化剂，其EC50数值是53.9 II μmol/L 本论文的创新之处：首先采用混合溶剂法分别将三个系列的难溶性小分子 Schiff碱金属配合物（DMSO体系）结合到水溶性的白蛋白（PBS体系）上，得到 新型水溶性白蛋白结合Schiff金属配合物；其次，通过将Schiff碱金属配合物与 BSA 的结合，提高了蛋白质与Schiff碱金属配合物的抗氧化活性。 关键词：牛血清白蛋白，希夫碱金属配合物，抗氧化剂，羟基自由基 III ABSTRACT The searches for high efficient, low-toxic and inexpensive antioxidants have been one of the substantial subjects in many fields such as biology, chemistry and medicine. Many of Schiff-base metal complexes have been investigated as effective antioxidants, but their application was limited by some disadvantages. Serum albumi