液质联用技在食品安全检测中的应用研究.pdfVIP

摘要 摘 要 本研究的主要目的是为食品安全检测建立高效分离的、高选择性和高灵敏度的多残 留关键技术和确证方法。本文将先进的高效液相色谱一质谱联用技术应用于食品安全检 测中，建立了四类有害物质残留量的一系列检测方法。这四类研究对象包括10种禁用 染料、8种禁用兽药和2类有限量规定的兽药，都是食品安全检测中重点关注的物质。 建立的所有方法均经确证并已应用于实际检测，解决了食品安全检测中的～系列技术难 题。归纳出了一个应用高效液相色谱一质谱联用技术检测食品中有害物质方法开发的基 本模型，为开发同类方法提供了理论指导和范例。同时对化合物分子在二级质谱内的碎 裂方式和机理进行了初步理论探讨。 提出了用高效液相色谱法(HPLC)同时测定食品中苏丹l~4号染料的方法，食品中的 苏丹染料用正已烷提取，经中性氧化铝固相萃取柱净化后，用高效液相色谱分离，二极 管阵列检测器检测定量，并根据可见光谱图的相似系数进行定性。 提出了用HPLC一离子阱质谱联用法同时鉴定和分析食品中苏丹l~4号染料的方 Zorbax 法。样品用甲醇超声提取15min，静置过滤后直接进行仪器检测。采用Agilent ESI离子阱质谱进行质谱检测，质谱条件根据被测物分子量采用智能模式选定。对二级 质谱的碰撞能量进行了优化。分析了苏丹染料分子在质谱中的碎裂方式和机理，纠正了 权威文献上关于苏丹4号分子结构及其谱图解析的错误。方法检出限可达lng／mL，线 检疫行业标准。 椒制品中苏丹l一4号、苏丹橙G、苏丹红B、苏丹红G、苏丹红7B，黄油黄和对位红等 10种禁用染料的方法。用GPC对辣椒制品提取液进行净化。HPLC以甲酸水溶液和甲 C1 醇为流动相，通过Inertsil 8液相色谱柱使待测物质分离开，通过正模式电喷雾电离二 级质谱检测。对于所测的禁用染料，浓度线性响应范围在3个数量级，在不同基质中的 I 摘要 料在5种基质中的方法回收率在81．7～92．9％之间。日内和日间精密度(相对标准偏差 RSDs)分别为2．9～7．8％和3．9—8．1％，。 法测定，同位素稀释内标法定量。方法按照欧盟2002／657／EC指令要求进行了验证。8 17％之间，重复性在 种分析物在0．1、0．5和l”g／kg三个水平的回收率在87．3～1 3．35～10．1％，室内重现性在3．21一10．3％。8种分析物的确定限(decisionlimit，CCa)为 0．029--0．049．g／kg，检测能力(detectioncapability,CCp)为O．04％4)．083Itg／kg。 MAX固相萃取柱净化，液相色谱 方法。样品经乙腈．丙酮(80：20，v／v)提取后，过Oasis 串联质谱条件为负模式下多反应监测，外标法定量。方法在低浓度和高浓度两个水平范 定量限(LOQ)为0．021ag／kg。本方法列为中华人民共和国检验检疫行业标准。 种代谢物的残留量的方法。样品用乙酸乙酯提取，经凝胶渗透色谱净化，液相色谱串联 肌肉中为3．g／kg。方法的LOQ在肝脏、肾脏中为20I-tg／kg，禽蛋、肌肉中为10I．tg／kg。 通过上述方法研究，提出了一套应用高效液相色谱一质谱联用技术检测食品中有害 物质方法开发的基本模型：1．选取适当溶剂采取超声、振荡等手段从样品中提取被测物； 2．用GPC技术去除提取液中的蛋白、脂肪、天然色素等大分子量的共提取物；用以消 除基质效应和保护色谱柱；仍有干扰时采用SPE技术进一步净化：3．利用高效液相色谱 分离目标化合物以及其它分子量接近的杂质：4．按目标化合物分子量的不同，在其保留 时间附近的时间区段内优化二级质谱条件。不同分子量的物质通过检测其分子离子信号 而分别得到检测。对于同分异构体等分子量相同的物质，根据其分子离子在质谱中碎裂 方式的不同，选取不同的子离子作为检测离子，使其分别得到检测；5．采用溶剂校正曲 线与基质匹配校正曲线进行统计分析，检