果蝇的外部形态观察及饲养技术.pdfVIP

实验四 果蝇的外部形态观察及饲养技术 【主要内容】 1.果蝇的外部形态观察及饲养技术 2.果蝇遗传性状系列杂交实验 3.数量性状遗传 4.粗糙链孢霉的杂交 5.人工诱发多倍体植物 6.果蝇唾腺染色体 7.人的外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 8.染色体G 带技术 9.果蝇系列杂交实验结果的观察与统计 【实验目的】 1、了解果蝇的生活史，识别雌雄蝇和几种 常用的突变类型。 2、掌握果蝇的饲养和管理技术为下一步果蝇的系列遗传实验作准备 【实验原理】 （黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）属双翅目昆虫，具有完全变态。作为实验材料具有如下优点： 1.生长迅速，在25℃条件下，10～12 天可完成一个世代； 2.繁殖能力较强，1 只♀果蝇可产卵400 ～ 500 枚，因而可以在短时间内获得大量子代，有利于作遗传学分析； 3.容易饲养，饲料易得，实验需用空间较小； 4.突变性状达400 以上，并且多是形态变异，便利于观察； 5.染色体数目少(2n=8），突变基因容易在染色体上定位。 正是由于果蝇在实验上具有以上优点，所以T．H．Morgen 能够以果蝇为实验材料验证了孟德尔的分离定律和自由组 合定律，并且发现了连锁遗传定律。 【1.果蝇外部形态的观察】 （1）果蝇生活史的观察 卵：♀♂果蝇羽化后12 小时内不能交配，所以选处女蝇要利用这12 小时。超过12 小时开始交配，2 天后开始产卵， 每只雌果蝇一生中可产卵400—500 枚，卵长0．5mm，椭圆形，端部两侧各具一纤丝。 幼虫：受精卵经1-2 天孵化（25℃时12 小时开始孵化），经4-5 天2 次蜕皮，成为3 龄幼虫，体长可达4-5mm。 蛹：3 龄幼虫爬上培养瓶内壁化蛹，蛹梭形、由淡黄至黄褐色。 成虫：蛹期约4 天开始羽化，一般傍晚羽化的数量比黎明的多。刚羽化的成虫体较大。色较淡、翅还未展开、体表 因未完全几丁化（chitinous）而显得较软。 果蝇世代图 （2）野生型与突变型相对形状的观察 1.逐一麻醉各品系果蝇（注意要适度麻醉）。 2.把麻醉的果蝇倾倒在白瓷板上，移到解剖镜下观察。 3.鉴别野生型与突变型的相对性状。 果 蝇 类 型 复 眼 体 色 翅 型 刚 毛 野生型 红色 灰黄 长翅 直 突变型 白色 黑檀 残、短 卷曲 图片：野生型与突变型果蝇的眼色、 野生型与突变型果蝇的体色、野生型与突变型果蝇的翅形、 野生型与突变型果蝇的刚毛、 直 刚毛、 卷刚毛 （3）雌雄果蝇的观察与鉴别 第一性征： ♂腹部末端无几丁化黑点 ♀腹部末端有几丁化黑点 副性征： A.腹部末端尖长（ ♀ ）对顿圆（♂ ） B.腹部背面有3 条黑色条纹对5 条黑色条纹 C.腹部腹面有4 各腹片对6 个腹片 D.第一对足的跗节有性梳对无性梳 E.体型较大对较小 图片：雌雄蝇、 雌雄果蝇形态特征比较、 果蝇第一对足跗节基部的性梳 【2.果蝇的培养】 （1）培养基的配制 培养基配方： 以配制1000ml 为例，需要红糖80 克，琼脂10 克，麦麸80 克，玉米粉20 克，丙酸7ml，酵母10 克。 配制方法： 1.将红糖80 克、琼脂10 克、水700ml 置于锅里共煮沸至全溶化。 2.麦麸80 克，玉米粉20 克，水300ml 调成糊状。 3.将2 加入1 中边煮边搅拌，连续煮沸20min，离火立即加入丙酸7ml，酵母10 克，搅拌均匀，趁热分装到消 毒过的培养瓶。 (2)接种蝇培养 待培养基冷却，水蒸气挥发后，塞好棉塞接好蝇种，放入25℃恒温培养箱中培养。 【注意事项】 1.分装培养基时注意不要沾到试管或培养瓶口，如果沾到，则待培养基凝固后，用拧干的酒精棉球把培养基下推， 以免棉塞蘸到培养基，造成污染。 2.配好的培养基应放到干净的地方保存。 3.在接放果蝇时，要注意正确使用乙醚麻醉剂，用完后应立即盖好，同时实验室保持通风。 【作业】 1. 把观察五个品系的相对性状