体外CIK细胞的细胞因子表达谱研究的初步探讨.pdf

维普资讯 CIK细胞的细胞因子表达谱研究的初步探讨—第8 体外 CIK细胞的细胞因子表达谱研究的初步探讨① 雷 静② 钱 曼 吴芝莉② 张尚权② 严缘 昌② (华东师范大学生命科学院，上海 200062) 中国图书分类号 R392．11 文献标识码 A 文章编号 1000-484x(~．oos)08-0s89-05 [摘 要] 目的：探讨 CIK细胞的细胞因子表达谱。方法：FicoU分层液分离人外周血得到非粘附性淋巴细胞 ，体外经 IFN一7、IL-113、IL-2及抗 CD3单抗诱导分化成 CIK细胞。流式细胞术鉴定细胞表型，RT-PCR定性和半定量检测细胞因子的表 达。结果：CD3CD56细胞百分率均可达 50％以上，增殖活性随培养时间的延长而上升，最高集 中在 14—21天。该诱导条件 下获得的CIK细胞不表达 IFN． IFN．K和 IFN-X，其他IFN成员多集中在 1O一2O天高表达，初期和末期都较低；IL家族多数成员 在6 10(或20)天时稳定表达，后略有下调 ；TNF-~和TRAIL各时期组成性表达，表达水平变化很小或几乎不变。TNF-a第2O 天时高表达。TGFq3。则集中在后期表达，个体差异小。结论：在体外 CIK细胞能广泛表达多种类型的细胞因子。 【关键词】 CIK；细胞因子表达谱；RT-PCR Studyon cytokineexpressionprofliesofCIK cellsinvitro LEI如 ，QIAnMin，删 Zhi-Li，ZHANGShang-Qtmn，YANYuan-Chang．Collegeof Science，EastChinaNormal Universy，Shangha i200062，China A【bstractJ Objective：ToinvestigatetheeytokineprofileexpressedbyCIKceils．Methods：CIKceilswereinducedfromperipheral bloodmononudearcellsinthepresenceofIFN一7，IL-I~，IL-2andmAbagainstCD3 ThephenotypenadelraracterizafionofCIKcellswere identifiedbyflow cytometricanalysis．CytokineexpressionprofilesweredeterminedatnfftNA levelbyesmi—quantitativeRT-PCR．Results：The percentageofCD3 CD56 positiveceilsreachde uptoorlfigherhtna 50％ ．CIK ceilscouldn’texpressIFN-oJ、IFN·KnadIFN— underthis kindofcondition．ButrileycouldexpressIFNsprincipallyonday10to20．Thelevelof wentdownaftersteadilyexpressedonday6tol0 or20)． 口nad删 Lconstitutivelyexpressedduringtimcultureperiodinvitro．TNF-amaintainde highexpressiononday20．TGr-~, mainlyexpressedonday30．Condusion：CIKcellsCna widelyexpressvariouskindsofcytokinesinvitro． [Keywords] CIK；Cytokineexpressionprofile；RT-PCR 1986年 ，Schmidt和 Lala．ier等u 先后报道用细 报道 ，本文用半定量 RT．PCR技术，在RNA水平探讨 胞因子从外周血单核细胞 中诱导出表型为 CD3 了 C1K细胞因子的表达情况 ，这对进一步了解 C1K CD56 的细胞。因其在体外能经 1L-1、IL-2、WN．等 在抗肿瘤和抗病毒及其他免疫相关疾病中的作用机 的刺激诱导分化成效应细胞，故称为细胞因子诱导