第二讲 实验设计.ppt

第二章 实验设计 1 实验设计的任务 任务: 使实验结果能够准确地回答要研究的问题。 1)有效地减弱或控制干扰因素,突出主要因素。 2) 尽可能地节省人力、物力和时间等。 3) 保证实验数据的精密性、重复性、稳定性、可靠性和可比性。 4) 从实验中获取更多的信息, 得到具有充分代表性的数据。 5)选用先进的实验设计。 2: 考虑的因素 1）明确、突出目的：中心！ 2）确定实验方法 观察指标 实验方法? 观察指标? 模型？ 实验指标：量反应和质反应 要求：专一性强、稳定和客观。 3）合适的实验标本 在体 in vivo 离体 in vitro 在体：治疗、预防给药？ 离体：组织、器官、细胞、亚细胞、分子 在体：动物？小白鼠、大白鼠、豚鼠、兔、猫、狗和猴 因素？ 小白鼠 来源广, 繁殖能力强, 价廉。 药物作用的筛选； LD50的测定以及避孕药物的初选 ED50? 特殊：基因缺陷小鼠，转基因小鼠 大白鼠 体形大小适中, 小白鼠用途 关节炎、降血压和抗胃溃疡试验。 无胆囊, 利胆试验。 一些特性与人相似, 大白鼠是在新药研究中最常用的一种动物. 慢性毒性试验, PK 基因缺陷动物 豚鼠: 对组胺敏感, 平喘药和抗过敏药物 对结核杆菌敏感, 抗结核药物的研究 兔: 体温稳定,解热药物研究热原检查 雌兔避孕药物研究。 猫: 血压稳定, 循环系统药物研究。 猫、狗、猴等有呕吐反射, 可用作镇吐药物研究。 鸽用:镇吐药物研究,对洋地黄类药物敏感,效价测定。 鹌鹑:动脉粥样硬化研究。 蒙古沙土鼠:脑缺血药物研究。 动物实验条件、环境要求：温度、湿度、光照、洁净度、饲养条件。 动物伦理 动物种属差异,质和量 组胺: 猫、狗血压降低, 兔 血压升高。 丁苯氧酸: 人,狗 强效利尿药, 大鼠 无利尿作用。 药效学研究需要用两种或以上种属动物, 其中一种为啮齿类, 另一种为非啮齿类动物, 这样结论才可靠？遗传特性相差大。 实验指标 1. 生物反应类型 量反应、时反应 和质反应 1) 量反应 所得资料为量反应资料或计量资料。 参数 均数、例数(n), 标准差(s)和可信限等; 在一定条件下,质反应与量反应可以互相转换。 量反应所获得信息比质反应多.通常用量反应指标, 有时只能用质反应指标, 毒性试验。 2) 时反应 3) 质反应 反应资料或计数资料。 参数: 例数(n), 阳性例数(r)和阳性率 p(p=r/n)。 2 实验指标的选择 专业方面和统计学方面 专业方面：1)针对对要研究的问题,反映研究问题的本质, 往往与实验方法联系。 2)尽可能选用客观指标。 统计方面考虑, 对指标选择有几点要求: 1）指标的同质范围要宽； 2）同剂量各次反应间差异要小 3）反应度随剂量灵敏地变化,即灵敏度高， “因变系数CC” 4）同剂量各反应的差异, 应服从或近似服从一定的数学分布律, 便于统计分析。 3 量反应指标表示方法 反应本身的性质 第一种情况 反应值与机体其它生理指标无关系。这种情况用反应数值表示。 第二种情况 反应值随机体的另一生理指标变化而变化, 应把反应值与该指标联系起来, 用相对值表示。 药物作用的表示方法 用药前后反应值与对照反应值的差值, 即反应增减值; ?=Rtest-Rcontrol 药物所致反应增减值与对照反应值之比值, 即反应增减相对值 ?%=(Rtest-Rcontrol)/ Rcontrol?100% 药物反应值性质不同, 不同表示方法 . 第一种: 药物反应值的增减程度不受对照水平的影响。用反应的增减值直接表示。 第二种 药物反应值的增减程度受对照反应水平的影响。几种类型： 第一种类型 药物反应值的增减程度与对照反应水平方向相同, 即对照水平高时同反应的增减值大。 对照水平情况不同，表示方法不同。 1）对照反应值比较稳定, 此时仍用反应增减值表示。如血钙浓度。 2）对照反应差别大, 但与反应增减值比较不是太大, 也不是太小, 这种情况一般用反应增减的相对值表示。 3）对照反应差别大,对照水平与用药后的反应值比起来很大或很小, 这种情况下仍用反应增减值表示为妥, 而不宜用相对值表示。 第二种类型 反应的增减值与对照水平相反, 即对照水平高, 药物的反应小, 反之药物反应值高,多数能增加生理病理反应水平的药物属于此类。一般用反应的增减值表示。 对于质反应指标,对照反应与用药反应的差别勿用相对值表示。