半夏泻心汤中黄酮、生物碱及其皂苷成分在大鼠体内的药代动力学的研究.pdfVIP

2013年《药物分析杂志》优秀论文评选交流会论文集 一3一 溶解并定量稀释为2“g·mL一的溶液，作为对照溶液(2)。各取20止注入液相色谱仪，己内酰胺按外标法 以峰面积计算，二聚体按己内酰胺的校正因子计算，结果再乘以5，其他杂质按对照溶液(1)中氨基己酸的主 峰计算。结果供试品溶液中的杂质主要为己内酰胺与二聚体，未检出其他杂质，见图2(图略)，结果见表1 (表略)。 2．3．7稳定性试验精密量取供试品溶液20灿，在不同时间点分别进样，考察供试品溶液的稳定性。结 果在24h内，未见有杂质增加，供试品溶液稳定。 3讨论 3．1检测方法的建立液质谱联用技术∞7】能够有效地用于药物中有关物质的鉴定，本文首先用LC—QT— OF／MS对杂质进行定性研究，确定主要杂质的结构后，再根据杂质特性，建立相应的定量测定方法。 氨基己酸经脱水缩合成后己内酰胺或二聚体后，形成酰胺键，紫外吸收与主药差异明显，己内酰胺相对 于氨基己酸的响应因子约为86，由于目前未有氨基己酸二聚体的对照品，本文尝试根据物料平衡的原理，基 于氨基己酸在加热条件下仅生成己内酰胺和二聚体的基础上，对二聚体的响应因子进行了考察，相对于氨基 己酸的响应因子约为16。因此在计算杂质含量时，应采用外标法和加校正因子的自身对照法。若采用不加 校正因子的自身对照法计算，结果偏差较大。 3．2与EP方法的比较EP收载的氨基己酸原料药采用薄层色谱法检查茚三酮正反应物质，经试验，该考 方法的检测限为50ng，相当于主药量的0．1％。由于已内酰胺不与茚三酮反应，因此该色谱系统无法对己 内酰胺进行控制，也无法反映注射液中微量二聚体的真实情况。 3．3杂质限度据文献【8 3报道，己内酰胺具有遗传毒性，能诱导DNA链构象的显著变化，应严格控制其含 量，因此根据《化学药物杂质研究的技术指导原则》制剂质控限度的要求，限度控制为0．15％。对于二聚体 等其他杂质，参照EP收载的氨基己酸原料药，限度控制为0．5％。 3．4灭菌工艺对有关物质的影响按词色谱条件检测氨基己酸原料药，结果仅检出二聚体。模拟注射液处 方，将氨基己酸原料药和水置于顶空瓶中105oC加热30rain，结果表明，加热后的样品中己内酰胺和二聚体 min： 均检出，可以推测己内酰胺是在制剂灭菌过程中产生的。将同一企业不同灭菌条件下(100℃、30 808061、1003111、1003112；121oC、15 对有关物质结果影响较大，121℃、15min灭菌条件下，己内酰胺的含量增加明显。 参考文献(略) 半夏泻心汤中黄酮、生物碱及皂苷成分在大鼠体内的药代动力学研究 王莹，肖娟，蔡巧玲，袁瑾，王新宏，安觳，马越鸣 (上海中医药大学中药学院，上海201203) 摘要 目的：建立血浆中18个活性成分的LC—MS／MS分析测定法．研究半夏泻心汤中黄酮、生物碱及皂苷成分在大鼠体内 的药代动力学。方法：取血浆样品0．1mL经甲醇沉淀蛋白、丙酮一乙酸乙酯(4：1)萃取后，由InertsilODS—SP色谱柱(100 lain×2．1 mm，5斗m)分离，流动相为甲醇一0．1％甲酸(含5mmo]·L。醋酸铵)，梯度洗脱。采用电喷雾电离源，多反应监测 模式(MRM)测定各成分的血药浓度，DAS2．0计算其药动学参数。结果：血浆中18个成分的提取回收率均大于75％；LC— h；生物碱成 分出现多峰吸收，且半衰期均大于13 mg·h·L～，甘草酸部分代谢为甘草次酸吸收入血。结论：建立的LC—MS／MS分析方法灵敏、准确，可用于半夏泻心汤中活 性成分的药代动力学研究。结果表明大鼠口服半夏泻心汤后，血浆中可检测出15种活性成分，其体内吸收量和吸收快慢差异 较大。 关键词：半夏泻心汤；活性成分；黄酮；生物碱；皂苷；液相色谱一质谱联用；药动学 2013年《药物分析杂志》优秀论文评选交流会论文集 Pharmacokineticsof and inrats、订th