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NH4C1抑制非洲菊舌状花展开 梁敏婷 王小菁 (华南师范大学生命科学学院，广州，510631) 花形是观赏花卉两大重要品质特征之一，花瓣是花中最引人注目的器官，其发育过程受 多种内外因子协同作用与调控，我们的前期工作发现NH4Cl对非洲菊舌状花的展开有抑制 作用。本论文在实验室已建立的非洲菊(Gerbera hybrida)舌状花离体培养体系及获得的SSH 杂交文库基础上，对NI-14CI调控非洲菊舌状花的展开进行研究。获得主要结果如下： 1．在添加NH4+培养基中生长的非洲菊离体舌状花展开受到抑制卷曲，且易褐化坏死。 培养基中添加NH4+后，再加入其它盐类能减轻或解除这种毒害作用，因此，NH4+抑制非洲 菊离体舌状花的展开是单盐毒害现象。 2．NH4+明显抑制舌状花花瓣上、下表皮的生长，上表皮的抑制反应更为显著。NI-14+ 条件下离体培养lld的花瓣自然宽度为对照的66．3％。离体花序实验也证实了N地+对舌状 花展开的抑制作用。 3．NH4+抑制上表皮的生长是细胞长宽减小和数目减少共同作用结果，抑制下表皮长度 的生长也是细胞长度减小和数目减少共同作用的结果，其中，细胞长度的减小是主要原因。 而抑制下表皮宽度的生长主要通过细胞数目减少实现。离体花序培养实验也得到相同结果。 4．石蜡切片观察表明，NI--14+处理后舌状花变薄，海绵状薄壁细胞轮廓不规则、皱缩， 这可能也是造成花瓣不能正常展开的原因之一。 5．生物量的积累是花瓣生长的重要方面，NH4+抑制舌状花的生长也通过干、鲜重的减 少来实现。 6．在已建立的SSH库中挑选与细胞生长有关的EST，克隆基因全长，获得新基因： GenBank收录后的访问号分别为： 水孔蛋白(GAQP)和前纤维蛋白(GPRO)，被NCBI EUl42844、EUl42845。 7．以大田生长的非洲菊为材料进行Northern blot实验。结果表明GAQP在非洲菊各器 官中皆有表达。在Pl至P6舌状花中，P5期表达量最高。活体P2的舌状花的尖部表达量最 高，基部最低。将P1．5进行离体培养时，GAQP在培养2d对照舌状花中表达水平与培养前 相仿，光照培养后略为下降，并保持在低水平，6d时表达有所增加。而NH4+处理后2d GAQP 的表达比对照明显下降。花序验证结果也显示，NH4+使GAQe在舌状花中表达下调。 8．大田生长的非洲菊GPRO与GAQ尸的表达模式类似。将P1．5进行离体培养时，GPRO 在经2d离体暗培养的舌状花中表达水平与培养前相仿，光照后的第3d明显表达下调，以后 的几天中表达持续增加；NH4+处理后第2d基因表达比对照明显下降，但随后第3d、4d高 于对照，第5d与对照无明显差异，第6d又比对照表达量低。