LC20A液相色谱仪使用维护操作规程.docVIP

1. 目 的：制订LC-20A高效液相色谱仪维护操作规程，确保准确测定药品含量。。泵：LC-20AT；自动进样器：SIL-20A；色谱柱柱恒温箱：CTO-0AS；检测器：SPD-20A紫外检测器4.2 检测准备4.2.1制备所需的流动相，有机溶剂用0.45μm的有机滤膜过滤，水溶液用0.45μm的水滤膜过滤，超声脱气20min；4.2.2连接色谱柱：将检测所需的色谱柱连接到柱温箱中；4.2.3配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用0.45μm滤膜过滤进 1.5mL样品瓶中；4.2.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常；4.2.5将准备好的流动相，依次插入相应的管道。4.3启动仪器4.3.1先启动电脑，再依次开启液相色谱检测仪组件：LC-20AT → CTO-10AS → SIL-20A → SPD-20A；4.3.2双击，启动“LC Solution Launcher”，单击屏幕左侧的“” 标签，点击，登陆LC solution 实时分析界面。4.3.3单击左侧“LC ”的按钮。进入 模块，点击复位，再点击自动配置连接仪器。4.4进样准备 4.4.1设置进样方法：在实时分析界面的参数设置版面根据样品的需要设置合适的参数，保存为进样方法；4.4.2系统排气：打开设定好的进样方法，点击右上角工具栏中的图标自动排气min，然后点击工具栏的图标进行进样器排气25min；4.4.3平衡色谱柱直到基线波动在±0.05mV为止（一般30min）；4.4.4将准备好的样品瓶从编号1开始依次放入105孔样品架中。4.5开始进样4.5.1单次进样：点击按钮，弹出单次运行对话框，在中加载已保存的方法文件，在中键入数据文件名称，在中输入需要进样的样品瓶编号，在输入样品架编号，在输入进样量，点击确定，开始单次进样；4.5.2批处理：点击按钮，会显示批进样列表，在输入需要进样的样品瓶编号（1、2……），在输入样品架编号，在中输入样品名称，在选择“未知”，在输入进样量，在中选择IT QT（定量积分，定量计算）”作定量定性分析，在中加载已保存的方法文件，在数据文件中键入数据文件名称，点击OK确定。然后点击保存方法。点击，开始批进样处理。要停止批处理分析，单击 [批处理] 助手栏中的图标。4.6标准曲线的生成：4.6.1创建数据分析参数：点击 ，进入LC solution 再解析界面，弹出对话框，打开标准样品的液相色谱图，点击，进入数据分析向导，设置所需的积分参数，点击下一步，在需要的保留时间的峰前面的方框内打√，点击下一步，选择标准样品级别,点击下一步，再点击下一步，在“”分别从低到高输入标准样品的浓度，其余参数不变，点击完成。点击右下角的，点击→“ 方法文件另存为”,将积分方法文件命名并保存。4.6.2将数据分析应用到原始方法：点击 ，将标准样品的液相色谱图拖动到批量处理表中，在 中的第一行设为“”（点击单元格右下角的箭头，点击→“初始化校准曲线”），下面各行设为“”(点击单元格右下角的箭头，点击→“添加标准级别”）,在插入积分方法，在分别由标准样品的浓度从低到高输入水平级别（1、2……），其余参数不变，然后点击批处理助手栏的开始校准；4.6.3查看标准曲线：点击助手栏的,将显示标准曲线的相关数据，若不显示，则打开生成校准曲线的积分方法文件。4.7计算样品浓度：在LC Solution再解析版面，创建批处理表，将未知样品的液相色谱图拖至批处理表中，将全部设为“”，全部插入保存的积分方法，全部设为“0”，其余参数不变，然后点击批处理助手栏的，进行样品进行定量计算。双击样品的结果文件将看到所测样品在标准曲线的位置，点击右下角的中的“”，浓度显示在“Conc.”中。4.8仪器关闭4.8.1打开LC Solution 实时分析界面，冲洗管路20min，冲洗完毕后，点击工具栏的“关机”图标，退出系统，然后按顺序依次关闭液相色谱检测仪组件电源：SPD-20A→SIL-20A→CTO-10AS→LC-20AT；4.8.2关闭电脑，断开电源。注意事项：流动相必须要超声脱气20～30min，通过适当的滤膜过滤；2水相必须要当天制备，放置太久的水可能会长菌，从而导致管路堵塞；3进样器在进样的时候，不要打开自动进样器的门；4检测完毕后，用甲醇冲洗管道0min以上，甲醇min，以免有样品在管路和柱子残留；5关闭仪器的时候，必须先退出系统，听到“哔”一声之后，才能依次关闭仪器组件的电源；6若长期不启动仪器，要将管道充满甲醇，卸下柱子，封住端口，以免柱子内的有机溶剂挥发掉而使柱子失效。 相关文件和记录 DZ06.063 实验设备、仪器使用记录 变更记载 原版本号 变更原因及主要内容 2. 新增自动进样器、柱温箱、泵，操作系