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细菌室操作规程 痰 液 培 养 1、痰涂片，根据需要分别做革兰氏染，抗酸染色等。 2、将痰加入盛有15-20ml灭菌生理盐水的试管中，剧烈振荡5-10秒，然用接种环将沉淀于管底的脓痰小片沾出，再放入另一试管内，以同样的方法反复二次，最后剩余的脓痰接种在培养基上。 3、对可疑病原菌，应做涂片镜检，鉴定及药物敏感试验。 4、检出致病菌时，应报告：草绿色链球菌（+～++++）、 奈瑟菌（+～++++）、 致病菌名称：××× 5、未检出致病菌时，应报告：正常菌群。 细菌室操作规程 尿 液 培 养 1、用5-25μl加样器，加消毒后的无菌吸咀，吸尿液5μl滴注在血平板上，用接种环涂抹，待表面干燥后，35℃培养过夜，计数生长菌落数，结果乘以200，求出每ml的细菌总数(cfu/ml)。 2、对革兰氏阴性杆菌菌落计数小于105 cfu/ml，革兰氏阳性球菌计数小于104 cfu/ml，结果报告：细菌培养阴性。 3、对革兰氏阴性杆菌菌落计数大于105 cfu/ml,革兰氏阳性球菌计数大于104 cfu/ml有诊断意义,,应对细菌进行鉴定及药敏试验。 细菌室操作规程 血 液 及 骨 髓 培 养 1、无菌操作静脉取血5ml，0.5ml注入L型培养管，混匀后置烛缸内孵育；剩余血液注入普通培养瓶，置35℃温箱孵育。 2、血培养瓶和培养管经48小时35℃孵育后，在血平板或巧克力平板上盲目传种一次。 3、盲目传种后，培养瓶和培养管继续孵育至7天每日早晨取出检查有无生长，并摇匀培养液继续孵育。 4、肉眼见有细菌生长时应取生长物移种血平板，巧克力平板进行分离以获得纯培养，同时取生长物做革兰氏染色，将革兰氏染色结果，电话通知临床医师。标本经平板分离纯培养后，做鉴定和药敏试验。正式报告细菌名称和药敏结果。 细菌室操作规程 粪 便 标 本 培 养 1、按需要进行涂片，做不同的镜检和染色 2、接种SS平板及麦康凯或伊红美兰平板， 3、未发现沙门菌或志贺菌的可疑菌落，可报告：未检出志贺菌和沙门氏菌。 4、对疑似该两种细菌的菌落且同志贺菌诊断血清之一发生明显凝集者，可报告：“检出XX志贺菌” 并报出药敏结果；与沙门菌多价群因子诊断血清发生明显凝集者可报告：“检出XX群沙门菌”并报出药敏结果。 5、对疑似其他致病菌的菌落也做鉴定和药敏试验并报告。 细菌室操作规程 分 泌 物 培 养 1、对临床送检的分泌物标本，分别接种血平板及肉汤增菌，并取分泌物涂片且对涂片结果记录。 2、对血平板培养出的细菌进行鉴定和药敏试验并报告 3、当血平板未培养出细菌时，应对增菌肉汤进行转种血平板，对血平板培养出的细菌进行鉴定和药敏试验并报告，对血平板未能培养出细菌时应报告：无细菌生长。 细菌室操作规程 细菌的鉴定程序 培养出的细菌 + 革兰氏 染色 - 革兰氏阳性球菌 革兰氏阴性杆菌 触酶 氧化酶 + - + - 葡萄糖发酵 链球菌 接种氧化/发酵管 接种肠杆菌生化管 + - 肠球菌 按肠杆菌科编码系 厌氧葡萄糖 统鉴定 葡萄球菌 微球菌 - + 接种葡萄球菌生化管 接种非发酵菌生化管 弧 菌 凝固酶试验 按非发酵革兰氏阴性 气单胞菌 杆菌编码系统鉴定 邻单胞菌 金黄色葡萄球菌 葡萄糖发酵 -