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改变频率的刺激对蟾蜍坐骨经神的影响 【关键词】摘要；目的；材料；方法；结果；讨论；文献 【摘要】 肌肉、神经和腺体组织称为可兴奋组织，它们有较大的兴奋性。不同组织、细胞的兴奋表现各不相同，神经组织的兴奋表现为动作电位，肌肉组织的兴奋主要表现为收缩活动。因此，观察肌肉是否收缩可以判断它是否产生兴奋。一个刺激是否能使组织发生兴奋，不仅与刺激形式有关，还与刺激时间、刺激强度、强度—时间变化率三要素有关，用方形电脉冲刺激组织，则组织兴奋只与刺激强度、刺激时间有关。用方形电脉冲刺激组织，在一定的刺激时间（波宽）下，刚能引起组织发生兴奋的刺激称为阀刺激，所达到的刺激强度为阀强度，能引起组织发生最大兴奋的最小刺激，称为最大刺激，相应的刺激强度叫最大刺激强度；界于阀刺激和最大刺激间的刺激称为阀上刺激，相应的刺激强度称为阀上刺激强度。 刺激神经使神经细胞产生兴奋，兴奋沿神经纤维传导，通过神经肌接头的化学传递，使肌肉终板膜上产生终板电位，终板电位可引起肌肉产生兴奋（即动作电位），传遍整个肌纤维，再通过兴奋-收缩耦联使肌纤维中粗、细肌丝产生相对滑动，宏观上表现为肌肉收缩。肌肉收缩的形式，不仅与刺激本身有关，而且还与刺激频率有关。当刺激频率较小，刺激的间隔大于一次肌肉收缩舒张的持续时间，则肌肉收缩表现为一连串的单收缩；增大刺激频率，是刺激的间隔大于一次肌肉收缩的收缩时间、小于一次肌肉收缩的持续时间，则肌肉产生不完全强直收缩；继续增加刺激频率，使刺激的间隔小于一次肌肉收缩的收缩时间，则肌肉产生完全强直收缩。 【目的】 观察在刺激时间﹑强度变化率恒定的条件下，不同频率的电刺激对肌肉收缩的影响。学习微机生物信号采集处理系统的换能器的使用。 【材料】 蟾蜍或蛙，任氏液，微调固定器，张力换能器，微机生物信号采集处理系统。 【方法】 1．毁脑脊髓 ? 2．蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备 （1）剥去一侧下肢自大腿跟部起的全部皮肤，然后将标本俯卧位固定于蛙板上。 （2）在大腿背内侧的股二头肌与半膜肌之间，纵向分离坐骨神经至膝关节处，并在神经下穿线备用。然后分离腓肠肌的跟腱，穿线结扎，并连同扎线将跟腱剪下，一直将腓肠肌分离至膝关节。在膝关节旁钉一大头针，折弯压住膝关节，至此在体标本制备完成。 3．刺激及记录装置连接 （1）将腓肠肌跟腱的扎线固定在机械换能器弹簧片上，不宜太紧，此连线应与桌面垂直。 （2）把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，应保证神经与刺激电极接触良好。 （3）换能器的输出端与PcLab生物信号采集处理系统的输入通道2相连。PcLab生物信号采集处理系统的使用方法参阅附录5。 （4）PcLab参数设置： 刺激频率对骨骼肌收缩的影响处理 记录方式：连续记录；存盘方式：连续存盘；输入方式：DC；采样速率：1～5ms； 放大倍数：50～100。 刺激波宽：0.05～0.1ms可调；刺激强度：0.1～2V手动可调；刺激方式：连续； 频率调节：手动或自动。 观察项目 1、开始采样，点击“刺激”按钮，系统开始工作，适当调整放大倍数，X、Y轴压缩比，使肌肉收缩产生的张力与刺激波形图至最佳观察形态。 2、用最大刺激频率的连续电脉冲刺激，使刺激频率按1 Hz、2 Hz、5 Hz、10 Hz、15 Hz、20 Hz、25 Hz、30 Hz逐渐增加（或刺激间隔逐渐减小），分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不同频率时的肌肉收缩变化。 如采用自动频率方式，起始频率1Hz，结束频率30Hz，步长1Hz，刺激持续时间1s。 3．文件存盘：按下“停止”按钮，选中菜单栏“文件”主菜单栏下的“另存为”，将当前波形曲线另外取文件名存至硬盘。 4、观察测量：按下快捷工具栏中的“观察”快捷键，出现并移动十字光标，即显示当前位置参数，即可测量舒张期张力、收缩期张力、收缩期及舒张期时间，刺激强度、收缩期dT/dt。 5、计算打印：在收缩波形的起止间拖动鼠标，选中图形，点击“处理窗”并打印。即可完成全部实验。 结果处理 绘制刺激频率与肌肉收缩张力曲线。原始数据列表。打印刺激频率与肌肉收缩张力曲线图并进行标注。 注意 1.如果肌肉在未给刺激时即出现挛缩，是由于漏电等原因引起，需检查电器接地是否良好。 2.要将制备好的坐骨神经腓肠肌标本先放在任氏液中浸泡一段时间。 3.在肌肉收缩后，应让肌肉休息一定时间再作下一次刺激，特别是在观察刺激频率的影响时。 4.实验过程中保持换能器与标本连线的张力保持不变。 【结果】 图1 【讨论】 以最大刺激电压的连续脉冲刺激坐骨神经干，刺激波的间隔时间大于单收缩的持续时间，肌肉收缩波呈现与刺激频率相同的单收缩波；刺激波间隔小于单收缩的持续时间，肌肉收缩波发生融合（总和），融合发生于舒张期，出现不完全强直收缩；融合发生于收缩期，出现完全强直收缩波，但神经干动