bFGF和ki_67双重免疫组化染色法.pdfVIP

诊断病理学杂志 2002 年 6 月第 9 卷第 3 期 1·87 · bFGF 与 ki67 双重免疫组化染色法 (西安交通大学第二医院病理科 　西安 　710004) 黄 　莺 　王康敏 　康安静 　靳耀锋 　 ( ) 【中图分类号】　R361. 2 　　【文献标识码】　B 　　【文章编号】1007 - 8096 2002 03 - 0187 - 01 　　双重免疫组化染色是同在一张切片上显示两种不同抗 双重染色 ,取得了较好的效果。 原的免疫组化法 ,能同时观察细胞及组织中两种不同抗原的 Ki67 的染色抗原修复是关键 ,单纯酶消化或热修复不 分布情况 ,对于研究它们之间的关系具有重要意义。本实验 能暴露抗原 ,采用双重修复法效果良好。先用 0. 4 %的胃蛋 成功地在一张切片上显示卵巢肿瘤组织中碱性成纤维细胞 白酶处理10min ,此步骤的温度及时间要求严格控制 , 胃蛋白 ( ) ( ) 生长因子 bFG F 与增殖细胞核抗原 Ki67 ,用以观察 bFGF 酶配制好后放入 37 ℃即开始计时 ,如先预热到 37 ℃后计时 , 表达的细胞是否为增殖细胞 ,介绍如下。 则会引起过度消化及脱片现象 ,影响后面步骤的进行 ;然后 用热平台处理 10min ,即可暴露抗原。 1 　材料与方法 2 种抗体使用的顺序很重要 ,本实验中将低亲和力的抗体 11 　标本 　45 例卵巢肿瘤组织 ,常规 10 %福尔马林固定 , Ki67 用于第一染色 ,将高亲和力的 bFGF 作为第二染色 ,可以保 石蜡包埋 ,5mm 厚切片。 ( 证2 种抗体的高亲和力。选择不同种属的抗体系统 如鼠抗加 ( ) 12 　试剂 　bFGF 多克隆抗体 Santa Crus 公司产品 , Ki67 ) 兔抗 及两种位于不同细胞或同一细胞不同部位的指标 ,并选择 ( ) ( 单克隆抗体 Maxin Bio 公司产品 ,双重免疫组化 Kit Zymed 〔1〕 2 种不同的酶标记系统均可有效地避免交叉反应 。 ) 公司产品 ,均购自北京中山公司。 2〔〕