哺乳动物染色体高分辨显带的研究现状.pdfVIP

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遗传 HEREDITAS(Beiiing)13(6)38--4Q工夕夕1 哺乳动物染色体高分辨显带研究现状 李 来 记 (中国人民解放军兽医大学畜牧系,长春,130062) 高分辨染色体 H(ighResolutionChromosome, 获得早期染色体显著提高染色休的为辨力,但在 HRC)是指通过某种处理,获得有丝分裂早期染色休 标本制作过程中又同时存在两个重大难题:(1)细胞 (指晚前期、前中期、早中期染色体)分裂相,此时分裂 分裂指数低,由于加入核酸合成或染色体收缩抑制剂, 相的染色体较中中期染色体长,显带后可得到更多更 使细胞分裂指数显著下降。丫unis等报道(341,可以获 细的带纹,从而提高了人类对染色体的分辨力。Yunis 得12-15%的细胞分裂相,且处于前期、早中期、中中 (1976)134首先以氨甲喋吟使细胞同步化,再使细胞 期几乎相等。但绝大多数作者不能达到这个标准,例 短时暴露于秋水酸胺中,从而提出了对400,-550,850 如宿远等1i1实验结果表明,利用同步化方法、AMD掺 和1200条带时期的染色体进行研究的技术,高分辨染 人法、短时间秋水仙素抑制法获得的分裂指数分别为 色体应运而生。接着国内外许多学者对人类染色体进 2.4%,6.2%和8.5%,高分辨染色体在全部分裂相 行了高分辨分带研究 ’『一,,,一‘,’‘。人类细胞遗传学命名 中占的比例分别为”%,22.5%和16.2%;(2)染色 常务委员会 (1981)制定了人类高分辨染色体显带命名 体分散差。常规染色体jt究的一个特点是中中期染色 的国际体制’‘’‘。 这项工作大大促进了人类染色体高 体的分散好,染色体形态规整,便于剪贴。但高分辨染 分辨的研究,目前这项技术已经广泛应用于临床医 色体技术中一个关键问题就是早期分裂相染色体分散 学4-‘1,t8,11,373。动物遗传学家借鉴人类高分辨染色 困难,重叠、交叉和卷曲较多,严重影响分析。许多作 体技术对一些哺乳动物的染色体进行 了高分辨研 者试图利用改变低渗液浓度川,高空滴片和改变固定 究 “,,,,之盆,川,但理沦和应用方面的研究均进展较Ro 液中甲醇与冰乙酸比例”『,”’等来提高分散效果。据 本文对哺乳动物高分辨染色体研究的方法、进展以及 张思仲、胡修厚报道,固定液加入三氯甲烷对于染色体 意义进行了阐述,同时提出了值得探讨的几个问题。 的分散有促进作用L”。 一、高分辨染色体制作的方法及原理 二、哺乳动物高分辨染色体研究进展 染色体显带多少,即染色体的分辨力,与染色体的 一()恒河猴 (Macacamulatta) 长度有直接关系。在建立染色体高分辨技术之前,人 陈宜峰等利用氨甲喋吟结合胸普以及 Giemsa染 们对动物染色体的分析主要基于对中中期染色体的研 色的高分辨技术,对恒河猴外周血淋-5r细胞的晚前期、 究。早期染色体比较长,如晚前期的染色体比中中期 前中期、早中期和中中期染色体进行了C,带研究,并绘 染色体约长一倍,分辨力亦较高。用常规的细胞培养 制了恒河猴前中期和中中期染色体的G带带型模式 方法偶尔可以得到早期染色体分裂相,但观察到前期 图。结果表明,晚前期染色体的带数大约为600条带, 染色体的机会很少。高分辨染色体技术中的细胞培养 中中期有287条带,而前中期和早中期的染色体带数 方法与常规细胞培养方法的主要区别就在于高分辨染 则介于上两者之间[610 色体技术通过细胞分裂同步化处理或阻止染色体凝缩 二()马 E(q。二,caballus) 获得较多的早期细胞分裂相。 Maciulis等 (1984)[141采用改良的白细胞培养技 制备高分辨

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