猪MEF2A和MEF2C基因在金华猪背最长肌中表达与研究.pdfVIP

猪MEF2A和MEF2C基因在金华猪背最长肌中的表达研究 沈一飞，蔡兆伟，徐宁迎’ (浙江大学动物科学学院，杭州310029) 引言 肌细胞增强因子2(Mocyte 早被称为具有肌肉特性的DNA结合活性的凶子，对多种细胞的存活与分化进行调节。在脊 椎动物中MEF2家族由4个基因(MEF2A，B，C和D)组成，分别位于不同染色体上，通 过启动子的选择和mRNA的选择性拼接可以产生各种不同的MEF2蛋白质，对肌肉组织的分 化、维持和再生等有重要作用，并调控肉质性状相关基因的表达和功能。目前对MEF2因子 在出生后动物骨骼肌生长发育中的功能了解较少。我们研究了MEF2A和MEF2C基因在不 同日龄的金华猪背最长肌内的表达变化情况，希望能了解这两个基阗在猪上的表达规律，从 而为进一步探讨肌细胞增强因子2对猪肉质性状的遗传调控机理奠定基础。 材料与方法 实验猪群为浙江金华猪，选择胎次相同，初生重相近的60、90、120、150日龄的去势 公猪各3头(在相同饲养管理条件下，按正常营养标准饲养)，进行宰杀，取其背最长肌， 立即投入液氮冷冻，随后置于．70℃保存。提取总RNA，之后进行纯化，并检查RNA浓度、 纯度和完整性，接着对RNA进行反转录，以lS-actin基因作为参照，运用荧光实时定量PCR 检测目的基因的时空表达谱，分析MEF2A和MEF2C在金华猪中的表达差异。 结果 本实验采用2mu算法来分析基因表达的相对变化，它的前提假设是要求目的基因与参 照基因的扩增效率基本相同。本试验MEF2A和MEF2C基冈的扩增效率分别为100．3％和 104．3％，与参照基因p-actin的扩增效率103．3％接近，因此可使用2批。算法对结果进行分 析。实验结果显示MEF2A基阒从60到150日龄的表达呈递增趋势，60日龄至120日龄增 长较缓慢，差异不显著，从120日龄到150日龄增长极快，MEF2A基【大J的表达水平在不同 150日龄问随日龄增加而递增，其中60日龄至120日龄增长较缓慢，差异不显著，从120 日龄到150日龄增长较快，MEF2C基因的表达水平在不同日龄问的差异也极显著(P= 0．0049)，并且MEF2A的表达量均高于同时期的MEF2C的表达量。 讨论 多数与肌肉发生相关的基因与蛋白质均与MEF2相关联，冈此MEF2是一个不可忽视 的调控因子，目前已经引起越来越多的关注。据高智晟等研究报道MEF2A基闪在大白猪背 肌中的表达水平也随日龄增加而递增，与本实验结果较为一致。目前的研究已知出生后肌纤 维数目不变，故推测在出生后，MEF2基因家族主要功能可能是促进肌纤维面积的增加和维 持肌肉功能等，所以表达量呈持续增长趋势。Potthoff等就曾经报道MEF2C对维持肌小节 和出生后肌肉功能的完整性具有重要作用。然而要证实这个推测，还需要对MEF2基凶家族 的其它成员，以及MEF2A和MEF2C的功能进行更为深入的研究。 ·通讯作者。