荧光光谱仪稳态3D谱.pptVIP

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稳态3D荧光谱 Anthracene in Cyclohexane 稳态3D荧光谱的应用 多维分析技术是计算机信息处理在分析化学的体现,是当前荧光分析发展的一大趋势,主要用于光谱指纹分析、临床分析、多组分分析。 同步荧光法具有简化光谱、窄化谱带、减小光谱重叠、减小散射光的诸多优点,用于多组分分析。 NapthaleneAnthracene 稳态3D荧光谱在蛋白质分析中的应用 在蛋白质分析中,蛋白质中的色氨酸(Trp)和酪氨酸(Tyr)残基的荧光发射光谱相互重叠难以区分,选用Δλ≦20nm或Δλ≧20nm两种不同波长差的同步荧光扫描,可以区分Trp和Tyr残基各自的荧光发射光谱,偏振荧光已用于同时测定Trp、Tyr及止血剂与脂质体、血红细胞主U 客体分子间作用机制的研究。 三维荧光光谱(TDS)图谱直观性强,在癌细胞分辨、生物大分子变性猝灭等方面研究皆显示出独特的优越性。 稳态3D荧光谱在蛋白质分析中的应用 在普通荧光光谱中,蛋白质的Trp和Tyr发射光谱相互重叠,难以区分,但是,如果运用同时扫描激发和发射光谱的同步扫描光谱法,选择适当的Δλ进行同步扫描,可以将两种氨基酸的光谱区分开。 Δλ可根据同步荧光光谱的形状、带宽和信号强度的实验要求进行选择 。 溶剂的瑞利散射的二级透过和拉曼散射光的影响在三维测定中是十分严重的,尤其是溶剂拉曼散射与蛋白的荧光光谱重叠时无法得到清晰的TDS 信息预先在液池两侧激发光路和发射光路上分别放置互相垂直的偏振片后,散射光对荧光的影响可消除。得到的简称为TDSPS的三维偏振光谱。 HAS的3D荧光Map 不同蛋白中Trp和Tyr残基的含量差异 酸度对蛋白质变性的影响 应用 通过TDSPS提供氨基酸残基受各种微环境因素影响时荧光光谱变化的信息,从而可以分辨不同介质状态下的氨基酸残基,由此考察白蛋白在不同环境下的变性行为,以及与此有关的疾病诱因。 同步荧光 (用来鉴别环己胺溶液中的芳香族分子) * *

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