应用抑制性消减杂交技术克隆与筛选CVB3心肌细胞感染相关基因及中药干预的作用机理研究.pdfVIP

第八次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会论文集 本研究结果显示，中药治疗可降低6个月心绞痛再住院率，且中药治疗者6个月发生终点事件的风险 疗组6个月死亡、非致死性心肌梗死、再次血运重建、脑卒中、心功能不全等终点指标的发生率虽有低于 对照组的趋势，但两组未见明显差异，其原因可能有以下两方面：①冠心病二级预防的药物均为终生服用， 而本研究纳入的病例为服用中药≥1个月者，相比之下服用时间短，在一定程度上影响其疗效；②该研究 随访时间相对较短，纳入的病例数相对较少，有待进一步研究。 3．3影响AMI预后的因素 本研究通过Cox风险比例回归模型，筛选出影响AMI预后的因素，包括心功能不全、糖尿病、早期应 的保护因素，心功能不全和糖尿病是6个月预后的危险因素。一项回顾性队列研究[14]显示，年龄、心衰、 糖尿病等是AMI远期预后的危险因素：年龄增加10岁、心功能纽约分级升高1级，发生事件的风险分别 上升到原来的2．021倍(HR 1．863，95％ ％CI=1．627—10．031，P=O．003)；而使用ACEI是保护因素，HR 在一定程度上说明本研究的可靠性。 本研究采用前瞻性队列研究方法，以中医药辨证治疗为单一干预因素，观察其治疗AMI疗效，研究结 果显示中医药治疗在降低AMI患者6个月中医症状计分、血瘀证计分，降低6个月心绞痛再住院发生率方 面具有一定优势。但该研究为前瞻性队列研究，有待于进一步采用多中心、大样本、随机对照研究提供更 高级别的证据。 应用抑制性消减杂交技术克隆和筛选CVB3心肌细胞感染相关基因及 中药干预的作用机理研究 张玉梅张明雪何伟车红花顾平 辽宁中医药大学附属医院(沈阳，110032) 病毒性心肌炎(Viral 急性、亚急性或慢性的炎性病变。随着病情程度不同，临床表现差异很大。婴幼儿病情多较重，成年人多 较轻，轻者可无明显病状，重者可并发严重心律失常、心功能不全甚至有猝死危险。近年来，VMC的相对 发病率不断增加。因此，探究VMC的发病与防治机制研究成为热点。目前，VMC的治疗主要是针对病原和 保护心肌。而在针对病原方面，尚缺乏有效的抗病毒治疗药物；在保护心肌方面，由于病毒感染后期有免 194 第八次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会论文集 疫机制参与心肌损害，所以现在很多研究者已转向细胞免疫治疗，但细胞免疫对人体是一个巨大的伤害。 而中医药防治病毒性心肌炎，不仅可以有效地拮抗病毒活性，而且能够修复心肌损伤。 基于中医脏腑学及温病学理论，结合多年临床诊治经验，目前认为气虚血瘀是VMC恢复期及后遗症期 的主要病机，并据此精心筛选出由黄芪、白参、丹参、郁金、麦冬等药组成的益气活血中药复方来治疗VMC， 在临床上具有明显的抗心律失常、减轻心肌损伤等作用，但其具体作用机制尚不明确。鉴于此，本研究拟 subtractive hybridization， 建立CVB3心肌细胞感染模型，利用改良的抑制性消减杂交(suppression SSH)等分子生物学技术，探索受CVB3攻击的宿主细胞中与益气活血中药复方治疗组中基因的表达变化， 尝试从基因水平发现病毒性心肌炎的发病机制及益气活血中药复方调控VMC的作用靶标和途径信息，为进 一步深入研究其在VMC治疗过程中所具有的生物学效应和意义，奠定扎实的前期研究基础。 1材料和方法 1．1动物wistar种乳鼠由辽宁中医药大学实验动物中心提供。 1．2CVB3毒株CVB3毒株由哈尔滨医科大学微生物实验室提供。 1．3益气活血中药复方制备及工艺流程取饮片(黄芪、白参、丹参、郁金、麦冬等)22509加水煎煮三 第三次加8倍量水，煎煮1h；合并煎 次，第一次加10倍量水，煎煮1h；第二次加8倍量水，煎煮lh； 回收乙醇至无醇味的浸膏，用蒸馏水稀释至2250ml，搅拌均匀，静置12h，吸取上清液，加59活性炭， 搅匀，在100。C力I热30min，放冷至室温，4C冷藏24h，滤过。 1．4实验