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第二节 分子荧光分析法 四、荧光分析法的应用 （一）无机化合物的荧光分析 （二）有机化合物的荧光分析 第三节 色谱法 一、色谱法概述 术语：固定相；色谱柱；流动相；洗脱液。 分类： 根据流动相：气相色谱；液相色谱；超临界流体色谱法 改变固定相的材料：吸附色谱法，分配色谱法，离子交换色谱法，凝胶色谱法，生物亲和色谱法等 按照固定相的形状：柱色谱法，毛细管色谱法，平板色谱法。 第三节 色谱法 二、色谱分离过程和基本术语 （一）色谱分离过程 色谱分离是利用在一定温度下，不同组分在同一种固定相中分配系数的不同来达到分离目的。 色谱分离过程示意图 第三节 色谱法 （二）色谱图及基本术语 色谱流出曲线 （二）色谱图及基本术语 1. 基线（base line） 2. 峰面积与峰高 3. 区域宽度(zone width) （1）半峰宽 （2）峰宽 （3）标准差 第三节 色谱法 （二）色谱图及基本术语 4. 保留值（retention value） （1） 保留时间 （2） 死时间 （3） 调整保留时间 5. 分离度（resolution, R） (14.14) 第三节 色谱法 第三节 色谱法 三、塔板理论 色谱柱可看作由许多假想的塔板组成，每个塔板之间的距离称为理论塔板高度（Height equivalent to a theoretical plate；H），在一定柱长（L）中塔板的数目称为理论塔板数（n），则有： (14.17) (14.16) 第三节 色谱法 三、色谱仪 （一）气相色谱仪 1. 气路系统 2. 进样系统 3. 分离系统 4. 检测系统 5. 记录系统 典型的气相色谱仪示意图 第三节 色谱法 三、色谱仪 （二）高效液相色谱仪 第三节 色谱法 四、色谱定性与定量分析 （一）定性方法 （二）定量方法 1. 外标法 2. 内标法 内标法是选择一种纯物质作为内标物，将已知量的内标物加入到准确称取的试样中，混合均匀再进行分析，根据待测组分和内标物的质量以及在色谱图上相应的峰面积和相对校正因子，计算待测组分的含量。 五、色谱分析的应用 1. 在药学中的应用 2. 在医学中的应用 3. 水、空气、食品和其他农产品中污染物的分析 第三节 色谱法 * 基础化学 第十四章 现代仪器分析简介 Modern Instrumental Analysis 内容提要 1. 原子吸收光谱法 基本原理 原子吸收光谱仪 实验方法 原子吸收光谱法的应用 2. 分子荧光分析法 基本原理 荧光定量分析方法 荧光分光光度计 荧光分析法的应用 3. 色谱法 色谱法概述 色谱分离的基本原理 色谱仪 色谱定性与定量分析 色谱分析的应用 内容提要 教学基本要求 熟悉原子吸收光谱法、分子荧光分析法、色谱法的基本原理及其应用。 了解 原子吸收光谱仪、荧光分光光度计、色谱仪的基本结构；了解原子吸收定量分析方法、荧光定量分析方法、色谱分析的塔板理论及定性与定量分析的基本方法。 第一节 原子吸收光谱法 原子吸收光谱法，全称atomic absorption spectroscopy，简称AAS。 是基于测量待测元素的基态原子对其特征谱线的吸收程度而建立起来的一种现代仪器分析方法，又称原子吸收分光光度法，简称原子吸收法。 第一节 原子吸收光谱法 一、基本原理 （一）原子吸收光谱的产生 各种元素的原子结构不同，电子从基态跃迁至第一激发态时，吸收的能量也不同。 原子吸收光谱的波长（λ）或频率（ν）由产生跃迁的两能级的能量差（ΔE）所决定： (14.1) 第一节 原子吸收光谱法 （二）原子吸收光谱的测量 当光源辐射出含有与待测元素特征频率相同的光 （强度为I0）通过试样蒸气时，被蒸气中待测元素基 态原子所吸收，辐射光强度减弱。其透过光的强度 Iν与原子蒸气宽度（L）符合Lambert-Beer定律： (14.2) (14.3) A = Kc (14.4) 第一节 原子吸收光谱法 二、原子吸收光谱仪 光源 广泛使用的是空心阴极灯(hollow cathode lamp) 。 原子化器(atomizer) 原子化器的主要作用是有效地将样品中待测元素转变成处于基态的气态原子。它的装置主要包括：喷雾器，雾化器和燃烧器三部分。