TILLING技术的形成和发展及其在麦类作物中的应用.pdfVIP

　2010, 30(1):178-182 Journal of Triticeae Crops TILLING 技术的形成和发展及其在麦类作物中的应用 ① 陈锋, 徐艳花, 董中东, 许海霞, 程西永, 詹克慧, 崔党群 (, 450002) 　:TILLING(Targeting induced local lesions in genomes, 定向诱导基因组局部突变技术)是一种高通量 的等位变异创制和突变体快速鉴定技术, 其 质是将传统的化学诱变方法和突变的高效筛选有效结合的反向遗传 学研究方法。 其技术原理是将传统的酶切技术与 CR 技术相结合后采用红外双色荧光系统进行结果鉴定, 从而 筛选出相应的突变体。 传统的TILLING 技术主要用于筛选由人工诱导产生的突变体。 Ecotilling 技术由TILL- ING 技术延伸而来, 主要用于鉴定自然界中已经存在的突变体, 其与传统的 TILLING 技术的区别主要为构建 DNA 池时略有差异。 随着该项技术在拟南芥等模式植物中的成功应用, 越来越多的人开始将其用于基因组较大 的植物之中。 本文对近年来TILLING 技术在麦类作物中的应用进行了分析, 并通过比较不同植物突变体库中的 突变频率发现, 经EMS 处理的小麦等麦类作物突变体库中的突变频率显著高于其他植物, 因此相信, TILLING 技 术将会作为一种常规手段在麦类作物尤其是普通小麦改良中得到越来越广泛的应用。 :麦类作物;TILLING;Ecotilling :S512.1;S311　　　　:A 　　　　:1009-1041(2010)01-0178-05 Development of Targeting Induced Local Lesion in Genomes and Its Application in Triticeae Crops CHEN Feng, XU Yan- ua, DONG Z ong-dong, XU Hai-xia, CHENG Xi-yong, ZHAN Ke- ui, CUI Dang-qun (College of Ag ronomy, Henan Agricultural University, Zhengzhou, Henan 450002, China) Abstract:Targeting Induced Local Lesion in Genomes (TILLING)is a reverse genetic strategy that uses traditional chemical mutagenesis methods to create libraries of mutagenized individuals later subjected to high throughput screens for the discovery of an allelic series of induced point mutations in target genes.U- sually, TILLING technique consisted of applications of restriction enzyme digestion and olymerase Chain Reaction (CR)as well as infrared fluorescence detection of IRD700 nm and IRD 800 nm on acrylamide electrophresis by Licor-segue genetic analyser.Differing from TILLING only for induced mutations by chemical mutagens, Ecotilling stemming from traditional TILLING is generally used for identification of natural mutations and an obvious