DNA分子诊断技术在药用植物研究上的应用.pdfVIP

7 ，22(Iz 维普资讯 荡 在 A 分拿量f， ’安孺 i幸干 7，)z。 · 综述 · ／7r、 7 ＼，＼／ ＼ DNA分子诊断技术在药用 植物研究上的应用 i靛正 5 ￡7 (中国中医研究院中药研究所 北京100700) 7， 高文远 0范磊 赵淑平 肖培根 (中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所 北京 100094) 傅荣昭 (中国科学院遗传研究所 北京 100101) 随着科学技术的进步和国内外在新药研制 一 类技术的共同点是利用一种或几种限制性 内 开发中越来越激烈的竞争和挑战，新药研究的 切酶消化不同生物个体 的DNA分子，再通过 重点 日益转向传统中药及天然产物的开发和利 特异性的克隆或合成的探针进行分子杂交来揭 用…。药用植物是传统中药的重要来源，其研 示其 DNA 的多态性 。另一类是 DNA扩增 究必须现代化才能满足新药开发的需要。将先 技术和 电泳技术为核心的分子诊断技术，如 进的分子生物学技术与传统药用植物的研究结 RAPD(RandomAmplifedPolymorphieDNA)技 台起来，是药用植物研究现代化的重要手段。 术 【．CAPS(CleavedAmplifiedPolymorphicSe— DNA分子 诊 断技 术 (DNA-BasedDiagnostic quence)技术 等。这一类技术的共 同特点是 Technigues)是一种重要的分子生物学技术，本 利用合成的随机引物 (常为 5～10或更多个寡 文从几个方面探讨它在药用植物研究上的应 聚核苷酸)，通过 PCR扩增不同生物个体的 用。 DNA分子，然后直接进行 电泳分析来揭示其 1 DNA分子诊断技术 DNA的多态性。这些技术各有优缺点。利用 DNA分子诊断技术，也称 DNA分子标记 RFLP技术在基因定位、品种资源分析等多方 技术，是指通过直接分析遗传物质的多态性来 面 已取得了很大成功，但该技术不仅费力，成本 诊断生物内在基因排布规律及其外在性状表现 高．而且每次分析产生的多态性又不高。90年 规律的技术。任何生物种或个体都具有特定的 代初发展起来的RAPD技术，由于简单快速 曾 DNA多态性．通过直接诊断分析 DNA的多态 引起世界的广泛关注，并在基因定位与分离以 性，便能避开遗传特性表现过程中的环境因素、 及品种，资源评价等多方面取得了迅速发展，但 数量性状遗传或部分与完全显性的干扰，快速 该技术对反应条件过于敏感，因而可靠性差。 准确地测定DNA的差异性。 DNA指纹技术有较多多态性，技术可靠性也较 DNA分子诊断技术 已有 10多种，大致可 高，但制备各位点特异性寡聚核苷酸引物既费 分为两大类。一类是以电泳技术和分子杂交技 时又昂贵。 术为核心的分子诊断技术，如RFLP(Restrlc— 近年来创立了一种新的DNA分子诊断技 tionFragmentLengthPolymorphism)技术 ， 术——A