LKM-32-02细菌内毒素检测系统在血站使用初探.pdfVIP

LKM．32．02细菌内毒素检测系统在血站使用初探 刘芳 董小平 许淑春 陈琳 阜新市红十字会中心血站 卓培泽 湛江安度斯生物有限公司 【摘要l目的对一次性采血袋进行细菌内毒素含餐的检测。方法用动态比浊法定量检测细菌内毒 素。结果一次性采血袋的细凶内毒素含量全部符合国家标准。结论用动态比浊法定量检 测一次性采血袋的细菌内毒素含量是可行的。 I关键词】细菌内毒素检测系统 一次性采血器材 本血站于2008年7月采用LKM。32．02细菌内毒素检测系统对进站的一次性血袋进行细菌内毒 素定量检测，经过使用，确认应用该系统定鼙检测血袋、注射器中内毒素的方法可靠，能提供准确 的结果。现将检测不同批次血袋、注射器的内毒素含量结果报告如下： 1．实验材料和设备 1．1样品(S)：一次性采血器材(包括注射器、采血袋) 号：0805280。均由湛江安度斯生物有限公司提供，每批试剂均在有效期内。 1．3器具：砂轮，封口膜，试管架，无热原吸头，无热原反应管，无热原稀释管 1．4设备：细菌内毒素检测系统：LKM．32．02动态试管仪，英国莱伯金耐特有限公司出品， 器厂制造。 2．试验方法与结果： 2．1标准曲线的可靠性实验：按中国药典2005年版细菌内毒素检查法操作，结果符合规定。 2．2血袋的动态比浊法内毒素定越测定 系统”，使系统进入“数据采集”状态。 2．2．2内毒素溶液系列(C溶液)的制备 浓度系列备用，检测灵敏度为九=o．03125Eu／mi。 2．2．3供试品溶液(A溶液)的制备 血袋内液体血液保养液(记为S)的内毒素限值(L)为5．56Eu／ml，样品的最大有效稀释倍数 (记为S¨)，然后再朋BET水将S11作2倍稀释(记为S22)备用。 2．2．4含中间点内毒素浓度的供试品溶液(B溶液)的制备 取一定量的S1I稀释液与等管的0．5Eu／ml内毒素溶液混合，旋涡混合至少30秒，制备成样品 22倍稀释的含中间点内毒素浓度的供试鼎溶液。 溶解。 2．2．6加样：点击开始采集，取】2支反应管，制备标准曲线管分别加入0．1ml鲎试剂和O．1m1 和O．1mlA溶液：阳性对照管分别加入0．1ml鲎试剂和0。lmtB溶液，平行两组测定，结果计算时仪器 会自动取平均值计算。在电脑屏幕上可以看到反应的任一过程的动态曲线，直观地看到反应混合液 的浊度变化和内毒索水平。 ．141． 2．2．7将所有试管在混合仪上轻点混匀然后插入LKM．32．02动态试管仪的试管孔中，系统即自 动开始：lI：作，输入各试管的管号，名称等参数及设定反应时间。当设定反应时问结束，仪器即可自 动处理各种数据，打印出反应动态曲线及测定分析报告。 2．3实验结贝，见‘卜-表 3．讨论 3．1从表中可看剑，实验中样品通过使用稀释，}lJlll稀释到11倍，再川BET水稀释到22倍检测， 样品的内毒素i亓l收率均在50％R_200％范罔内，表明在本实验条件下，所稀释的样品浓度已对动态 比浊法内毒素定量测定无干扰。本检测浓度可以作为日常检查的样品浓度。 3．2对于一次性采血袋采用LKM．32．02细齿内毒素检测系统进行细菌内毒素含量的检测，不仅 操作简单，而且更能直观地观察到样品的变化情况，尤其是对于边缘值样品使Hj比浊法比使刚凝胶 法有更大的优点。这对于采血器材的内毒素含楚控制有重人意义。 3．3一次性采血器材使Hj凝胶法检脊，若操作不慎就很容易出现假R1性结果，相反HjLKM．32．02 细菌内毒素检测系统由于使j=}j计算机监控，样品的反应情况在显示屏上直观地反应出米，抗干扰能 力也比凝胶法强，而且检测结果与凝胶法一致。 3．4医疗领域中，在GMP条件中，热原就是内毒素，控制内毒素就是控制了热原，已成为一致 的认识ll】。内毒素是一个强力的热原物质，每毫升血液中达皮克级的内毒素就能使人发热反应。内毒 素血症也可能是免疫低下患者原冈不明发烧的冈素之一。通过对血站一次性采血器材中内毒素的定 量检测，不仅可以直观反映一次性采血器材的内在安全，而且对于血站选择一次性采血器材的供应 商具有重要的参考价值。用LKM．32．02细菌内毒素检测系统检测血袋的内毒素含量，方便、快速、 灵敏。检测数据均符合国家约品标准1