三七对大鼠胃癌前病变模型的作用和机理初探.pdfVIP

中国癌症研究进展0 三七对大鼠胃癌前病变模型的作用及机理初探 石雪迎赵凤志戴欣董秀云方杰杨会敏 慢性萎缩性胃炎伴有不典型增生、肠上皮化生是近年来公认的癌前病变，中医辨证类型复 杂，但多数以脾虚血瘀证候为主[1J。我们在以往的研究中初步观察到含有活血止血药三七的 中药方剂对实验性大鼠胃癌前病变有较好的疗效，为进一步明确三七的作用，我们进行了如下 实验。 材料与方法 I．材料清洁级Wistar大鼠，雄性，体重250～300 g，由中国医学科学院实验动物中心提 供。三七粉由北京中疰药大学东直门医院中药库提供，维甲酸由上海第六制药厂生产，批号 像分析系统，北京航空航天大学、空军总医院研制。 2．动物模型复制 按文献[2，3]方法进行。实验第16周末，将存活动物随机分为模型组、 ml／ 三七治疗组E0．6g／(kg·d)]、阳性对照维甲酸组[40mg／(kg·d)]和阴性对照蒸馏水组(2 d)。此外还设有一个未经任何处理的正常对照组。正常对照组和模型组大鼠于第16周末处 死，其余各组分别灌胃给药，每周6次，连续12周，至实验第28周末全部处死。 3．胃粘膜病理彤态学观察①胃粘膜大体形态观察：将胃沿大弯侧打开，平铺于硬纸板 上，观察并记录胃粘膜大体改变情况。②组织学观察：胃组织经10％福尔马林固定，常规石蜡 包埋切片，HE染色，光镜下计数慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生和不典型增生 的发生例数。③自动图像分析仪形态定量分析：大鼠胃粘膜慢性萎缩性胃炎检测指标为粘膜 腺体层厚度／粘膜肌层厚度(L1／k)，每张切片测量10个视野，胃体部、胃窦部各5个取平均 值；大鼠胃粘膜不典型增生检测指标为腺上皮细胞核面积／胞浆面积(N／C)，每张切片测量10 个视野，取平均值；腺体有核带面积／细胞总面积(ING)，沿细胞核近管腔缘连线构成的不规则 个视野，每个视野测量5个腺体，取平均值。 4．胃粘膜血流量(GMBF)测定大鼠禁食24h，麻醉后打开腹腔，自前胃无血管处剪开一 小口。吸净胃内容物，超声多普勒血流仪探头伸至胃大弯侧窦体交界处，待指针稳定后读数，结 果以电压值rnv表示。 作者单位：100700北京中医药大学东直门医院病理科(石雪迎赵风志戴欣方杰杨会敏)；北京医科 大学第三附属医院消化内科(董秀云) 三七对太鼠胃癌前病变模型的作用及机理初探 量、总酸度、总酸排出量、胃蛋白酶活性及胃蛋白酶排出量。胃液酸度测定采用酸碱中和滴定 法；胃蛋白酶活性测定采用血红蛋白底物法，以”℃孵育1min产生1／anol酪氨酸为一个活 性单位表示胃蛋白酶活性L…。 6．胃粘膜氨基己糖厦丙二醛含量测定大鼠处死后，沿大弯侧剪开胃腔，滤纸吸干胃粘膜 752分光光度计测定光密度值；丙二醛含量测定采用硫代巴比妥酸法【6J，荧光分光光度计测定 荧光强度。 。 结 果 1．动物一般情况实验第16周末，模型大鼠明显消瘦，蜷卧，毛竖立无光泽，进食减少，模 (P0．05，0．01)。 2．胃粘膜太体病理改变正常组大鼠胃粘膜呈粉红色，有光泽，被覆较多粘液，粘膜皱襞 表面光滑，走向规则，胃壁弹性良好。造模16周时，大鼠胃壁弹力减弱，粘膜层变薄，色苍白， 皱襞变平或走向紊乱，有的粘膜表面有黄染粘液被覆。胃窦部可见一至数个灰白色结节，有的 形成息肉状或菜花状隆起，质地偏硬。部分大鼠胃粘膜尚有糜烂灶或溃疡形成。治疗12周 后，蒸馏水组病变有加重趋势。三七组和维甲酸组牯膜病变均较模型组或蒸馏水组有明显改 善(表1)。 表1三七对胃癌前病变模型大鼠胃粘膜大体病理改变的影响 口：P0．05，b：P0 3．胃粘膜组织学观察正常组大鼠胃粘膜上皮细胞排列整齐，无缺损或脱落，腺体形状规 则，大小基本一致，腺上皮细胞多呈单层排列，固有层偶见少许慢性炎细胞浸润。粘膜肌层平 滑肌呈环行排列，未见增生及向粘膜层深入现象。造模16时，大鼠出现多灶