安祖花Arizona品种遗传转化体系的优化及矮牵牛查尔酮合成酶基因（PhCHS）的导入.pdfVIP

墨凳_u Onlinesystem：http：／w／w 囊 生■ ●■曩 … 茹wjaboitecho．rggy 暖疆 安祖花Arizona品种遗传转化体系的优化及矮牵牛查尔酮合成酶 基因(PhCHS)的导入 曹冬梅 康黎芳 李永平 段九菊 张超 王云山 山西省农业科学院 园艺研究所，太原030031 通讯作者，wangyunshan1234@sohu．tom 摘 要 安祖花A(nthuriumandraeanum)是近年来非常流行的年宵花卉之一。为了优化安祖花的遗传转化 体系，本研究以安祖花Arizona品种组培苗的叶片为外植体，将构建好的重组质粒pSN1301．HYG．PhCHS在 根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)GV3101介导下转化安祖花 。优化后的体系为：首先将组培苗幼嫩叶 片切块后置于1／3MS预培养基(附加200mg／LNH4NO，，0．5mgmBA，0．05mg／L2,4．D，5g／L琼脂，30g／L蔗 糖)中预培育3d，然后用根癌农杆菌(菌液OD。。=0．5)侵染10min，将侵染过的叶片接种于MS培养基，28℃ 黑暗条件下共培养3d，之后转移到附加有500mg／L羧苄青霉素和30mg／L潮霉素的愈伤诱导培养基中进 行筛选。结果表明，抗性愈伤组织形成率可达到5％～6％。对体系优化过程中获得的14株抗性转基因植株 进行PCR检测，其中9株为阳性，证实矮牵牛查尔酮合成酶基因(Petuniahybridachalconesynthasegene， PhCHS)已经转入安祖花Arizona中。该研究结果为利用转基因方法改良安祖花品种提供了技术保障。 关键词 安祖花，遗传转化，抗性愈伤组织形成率，矮牵牛查尔酮合成酶基因(尸CHS) Optimization of Genetic Transformation System of Anthurium andraeanum CV．ArizonaandPetuniahybridaChalconeSynthaseGene (PCHS)Transferation CAODong．M ei KANG Li．Fang LIYong—Ping DUAN Jiu-Ju ZHANG Chao WANG Yun—Shan InstituteofHorticulture，ShanxiAcademyofAgriculturalSciences，Taiyuan030031，China Corrspondingauthor,wangyunshan1234@sohu．com Abstract Anthurium andraeanum iSoneofthepopular1unarnew yearflowersinrecentyears．Inorderto optimizegenetictransofrmationsystem forAnthurium andraeanum，leavesofcultivarArizonaplantletswas usedasexplantsandtherecombinantplasmidpSN 1301．HYG．PhCHswastransferredtoA．andraeanum CV． ArizonamediatedbyAgrobacterium tumefaciensGV3101．Theemcienttransformation system ofrA． andraeanum cultivarArizonawasdescribedasfollows：Leaveswerecutand pre—culturedfor3donthe1／3M S culturemedium，whichcontained200mg／LNI~NO3，0．5mg／LBA，0．05mpjL2,4一D，5 LAgarand30g／L Sucrose，andtheninfectedwithA．tumefaciens(OD6oo=0．5)ofr10min．Theinoculated1eaveswereputonMS culturemedimu at28℃ underdarkconditionsofr3d．andthentransferredtothecallus—inducingmedium contained30mg／Lhygromycinofrresistantscreening．Thepercenta