海带褐藻糖胶组成结构和药理活性的研究.pdfVIP

杀灭率达到99．9％。 3．4毒理指标 皮肤刺激反应积分≤1．8，病理积分≤2。 3．5保质期 海康消毒剂在38C恒温下放置90天，各项指标无大的变化，保持期定为2 年。(参考文献略) 海带褐藻糖胶组成结构与药理活性的研究 郭亚贞施志仪1王造严伯奋 (上海水产大学食品学院200090；1上海水产大学生物技术研究中心200090) 褐藻糖胶是所有褐藻所固有的一种细胞间多糖，据报导有抗凝血、抗肿瘤、 澄清血脂等药理活性。对于海带褐藻糖胶的药理活性与组成结构之间的关系， 还未见有详细报道。本文对酒精分级沉淀得到褐藻糖胶各组分的组成性质进行 了比较分析，初步观察了其对体外培养的人肝癌细胞的抑制作用，还作了其对 小鼠体内的抗凝血实验，对其抗凝血性进行了测定，比较了不同组分的抗凝血 活性大小，试图找出组成结构与药理活性之间的关系。 ’ l材料与方法 1．1实验材料 酒精分级多糖组分：提取的海带褐藻糖胶配成5％溶液，加入20％的乙醇溶 液，收集沉淀，丙酮、无水乙醚漂洗，60C真空干燥得褐藻糖胶20％组分；上 清液调节乙醇为30％，如上收集沉淀为30％组分，再相继调节乙醇为40％、50％、 60％和70％，同样可得40％、50％、60％和70％组分． QGY-7703肝癌细胞，来源于复旦大学，属人肝癌细胞系；小牛血清购于中 1640为GIBCO公司产品；台盼蓝，进口 国科学院上海细胞生物研究所；RP～fl 分装，购予上海化学试剂采购供应站；肝素钠购于上海生化试剂商店，效价172．4 IU／mg。 实验小鼠，昆明种系，购自二军大动物饲养所。平均体重约209． 1．2红外光谱分析 Elmer-1600型红外光谱 纯化多糖样品，研磨均匀，压片机压片，Perkin 仪扫描。 1．3对体外QGY沅7703者肝癌细胞的抑制试验 C02培养箱 QGY一7703肝癌细胞用含10％4,牛血清的1640培养液，在37C 连续传代培养4～5代。取对数生长期的QGY7703肝癌细胞，先倾去培养液。用 EDTA清洗倒去，用胰蛋白酶消化后用含10％FCS的1640培养液调细胞浓度为 blue)染色，血细胞记数器上记数检查细胞活力， 样，用0．4％台盼蓝(Trypan 观察细胞死亡情况，连续记数70h。同时用PBS作对照实验。 ’ 1．4多糖抗凝血性测定 u 实验小鼠腹腔注射500l不同组分的褐藻多糖，30rain后用眼科弯镊摘去 一侧眼球，滴血在载玻片上后开始记时，每隔30s用大头针自血滴边缘向里轻 挑一次，直至能挑出血丝停止记时，该停止记时的时间即为凝血时间。实验还 采用400mg／kg小鼠尾静脉注射比较。同时都用肝素及生理盐水作对照实验。 2结果与讨论 ～ ， 2．1乙醇分级沉淀各组分的性质比较 由于褐藻多糖硫酸酯化学组分相当复杂，实验对褐藻糖胶采用了比较简单 的乙醇分级方法，并对分级得到各组分的理化性质进行了测定，结果见表I。 表1不同酒精度分级组分的理化性质 50％组分 60％组分 70％组分 比较内容， 20％组分 30％组分40％组分