大庆油田聚驱后油藏细菌群落演替规律研究.pdfVIP

第33卷第3期 大庆师范学院学报 V01．33No．3 2Q!!生三旦 』Q型曼盟垒垦Q!旦垒Q!塑Q盟Q曼丛垒垦堕盟!!垦垦塑堕! 丛盟：垫!! 大庆油田聚驱后油藏细菌群落演替规律研究 张虹，任国领，曲丽娜，丁海燕，张莹，黄永红 (大庆师范学院生命科学学院，黑龙江大庆163712) 摘要：应用分子生态学方法，研究了大庆油田聚驱后油藏微生物调剖过程中细菌群落结构变化规律。从大庆油 田聚驱油藏样品中提取总DNA，扩增其16SrDNA片段，PCR—DGGE实验，通过切胶测序分析研究了细菌群落结构 演替规律。微生物调剖试验结果显示，日产液下降3吨，日产油量提高11吨，含水量下降4吨。PCR—DGGE结果 显示，北一2—4一P49主要的优势种群为假单胞菌属(Pseudomonassp．)、不动杆菌属(Acinetobactersp．)、梭菌属 (Clostridiabacterium)、热微菌属(Thermomicrobiumbacterium)和一些未知菌属。细菌 sp．)、厚壁菌属(Firmicutes 多样性丰富，群落结构变化较大。对微生物调剖前后细菌群落结构的研究可以为微生物采油过程提供技术指导和 实际参考。 关键词：聚驱后油藏；细菌群落结构；PCR—DGGE；优势菌群；微生物调剖 作者简介：张虹(1964一)，女，黑龙江绥化人，大庆师范学院生命科学学院教授，从事微生物采油研究。 有限责任公司科技项目(dqc一2009一sc—ky001)。 O引言 聚合物驱油技术对大庆油田提高原油采收率起到了极其重要的作用…。但是，聚驱后油藏如何提高 原油采收率已经成为困扰大庆油田发展的问题之一。耗资少、能源消耗少、投入产出高、直接利用微生物 enhancedoil 菌种和对环境无污染的微生物采油技术(Microbial 研究热点。目前，微生物采油技术在大庆油田已经进入矿场实验阶段，但该技术仍存在一些关键性问题尚 未解决，即对微生物采油过程中菌群结构演替规律分析不够旧J。基于16SrDNA基因的微生物分子生态 学技术，研究油藏环境中的微生物突破传统培养方法认知和研究微生物的局限性，应用微生物分子生态学 方法研究油藏微生物群落结构的报道也日益增多【3j。Huang等H1利用构建16SrDNA克隆文库的方法，研 V 究大庆油田低渗透油藏微生物群落结构和种群多样性；OrphanJ等b1建立16SrDNA克隆文库与富集培 养相结合的方法，研究加利福尼亚某高温油藏中微生物的多样性；SheYH等哺1利用PCR—DGGE技术分析 了新疆克拉玛依油田一中区原油储层微生物群落结构及种群多样性。 落结构和优势种群变化规律，以及主要的采油功能菌，为大庆油田聚驱后油藏微生物采油技术现场试验提 供基础资料和技术指导。 1材料和方法 1．1样品来源和油藏特征 北一2—4一P49油井位于大庆油田北二西西块聚合物驱后区块，砂岩厚度、有效厚度、地层系数、静压分 别为24．6m、15．7m、15．57、12．13MPa。 90 万方数据 1．2买验方法 1．2．1样品采集及微生物群落基因组总DNA的提取 样品采集和基因组DNA的提取按文献[7]进行，基因组储存在一20℃备用。 1．2．2PCR—DGGE rDNA引物为大多数细菌16SrDNA通 PCR扩增：从油藏微生物基因组DNA扩增用于DGGE的16S 用引物为BSF338／BSR534[8]，扩增产物片段长约为200 Premix TaqVERSION，0．75灿正向引物(25mmol／L)，0．75止反向引物(25mmol／p,L)和适量超纯水 min，循环过程为：94℃，1min，30s；54oC，1min，30 (补足25止)。PCR扩增反应条件：95℃，预变性5