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基因工程及其应用 限制性内切酶（EcoRⅠ）作用过程 DNA连接酶的作用过程 ？如何让大肠杆菌生产人胰岛素？ * ??????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????????????????????????? 水母 荧光鼠 荧光鱼 荧光斑马鱼 第2节 基本过程 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的转基因生物或基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组(定向变异） 结果 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 实质 目的性强，育种周期短；克服了远缘杂交不亲和的障碍。 优点 “嫁接”了人胰岛素基因的工程菌 1.ONE 胰岛素基因从人体细胞内提取出来 2.TWO 胰岛素基因与运载体DNA连接 3.THREE 胰岛素基因导入受体(大肠杆菌)细胞 基因的“剪刀” 基因的“针线” 基因的运载体 人的基因怎样转到大肠杆菌的呢？ 基因的 指“ 限制性核酸内切酶 ” 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割 特点: “ ” 这个特点说明了： 酶具有专一性 点击播放 　　1、被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？ 思考: 形成的黏性末端不同 2、不同的限制酶呢？ 具有 基因工程的 指“DNA连接酶” “ ” 作用： 连接“梯子”断口的“扶手”而非“梯子”中间的“踏板”。 其作用与限制性内切酶相反，作用点相同 点击播放 　　 DNA连接酶的作用位点是：相邻的两个脱氧核苷酸的切口。即生成：磷酸二酯键。 基因工程的 目的基因 常用 的运载体： 质粒、噬菌体和动、植物病毒等 都有侵染或进入宿主细胞的能力 标记基因，便于进行检测。 其中质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子.　 ①从细胞中分离出DNA ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ②限制酶截取胰岛素基因片断 ③分离大肠杆菌中的质粒 ④ DNA重组 ⑤用重组质粒转化大肠杆菌 ⑥培养大肠杆菌克隆大量基因 ⒈要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是（ ）　 ①限制酶　　②连接酶　　③解旋酶　　④还原酶　　　Ａ．①②　　Ｂ．③④　　Ｃ．①④　　Ｄ．②③ ⒉实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别ＤＮＡ分子的ＧＡＡＴＴＣ顺序，切点在Ｇ和Ａ之间，这是利用了酶的（　 ） Ａ．高效性　　　　Ｂ．专一性　　　 Ｃ．多样性　　　　Ｄ．催化活性易受外界影响 Ａ Ｂ 随 练习 1、基因工程与作物育种 高二生物组 抗虫转基因植物 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 生长快、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 　　胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素，其产量之低和价格之高可想而知。 　 将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌，每2000L培养液就能产生100g胰岛素！使其价格降低了30%-50%! 　　基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 　　通常一种假单孢杆菌只能分解石油中的一种烃类．用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。 科学家还培育出能吞食转化汞、镉等重金属，分解DDT等毒害物质的细菌。 3、环境污染治理 *