.微生物的培养和应用.pptVIP

1·1微生物的培养和应用 几种选择培养基： 碳源 可作为碳源的物质有: 含碳无机物: 含碳有机物： 氮源 可作为氮源的物质有: 含氮无机物： b.含氮有机物： 1、下列细菌中，能利用含碳无机物作碳源的是 A 光合细菌 B 根瘤菌 C 硝化细菌 D 乳酸菌 2、培养大肠杆菌的培养基中，必需含有的碳源和氮源是 A 糖、有机酸等 B 二氧化碳、碳酸盐 C 蛋白质 D 无机氮化物 二. 无菌技术（思考） 1. 什么是无菌技术？包括哪些方面？ 2. 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 3. 消毒和灭菌有何不同？ 4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些？ 5·哪些地方有菌可能导致菌体感染？ 操作者 培养基、接种工具、器皿 空间 常用的接种方法 稀释涂布平板法VS稀释混合平板法 七、微生物的分离、数量测定 六、培养基的配制 （一）、细菌培养基的配制 1.计算: 100ml蒸馏水中各物质的量。 2.称量：注意牛肉膏的粘稠度大。 3.溶化： 牛肉膏连同称量纸一同放入 不断搅拌 4.调节pH: 7.0~7.2 思考：判断该培养基的作用是什么？ 5.分装： 培养基高度1/5 不要污染试管口 棉塞塞紧 6、包扎 7 .灭菌： 思考：灭菌的温度、压力、时间分别是多少？ 8 .搁置斜面/倒平板 图中哪些措施是防止杂菌污染的？ 培养基灭菌后，需要冷却到50度左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 刚刚不烫手。 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 防止瓶口附近的微生物污染培养基 平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 使培养基表面的水更好的挥发，防止皿盖上水珠落入培养基 在倒平板的过程中，不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 空气中的微生物会在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，最好不要用该培养基培养微生物。 六、接种技术 无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程称为接种。 1、接种工具 斜面划线法 问题：上述结果反应了什么情况？ 问题：可对菌液如何处理？ 菌种的保存 1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2、长期保存：甘油冷冻管藏法 从哪里可以获得微生物呢？ 微生物的大本营：土壤 从众多微生物中分离某种微生物有什么方法？ 根据微生物所需营养物质、氧气、pH不同利用选择性培养基选择。 对微生物进行分离的培养基是？ ——固体培养基 固体培养基上不同菌的区别是什么？ ——菌落 菌落作用：分类、鉴定的依据 菌落 细菌的菌落特征因种而异 菌苔：菌落连成片 主题：分离土壤中分解尿素的微生物 1、原理： 分离：以尿素为唯一氮源的选择性培养 基进行选择。 计数：稀释倒平板法 2、实验步骤： 问题：统计细菌和统计分解尿素所用的细菌的稀释倍数相同吗？ 细菌：4、5 、6 放线菌：3、4、5 真菌 2、3、4 问题：统计的菌落数往往比活菌实际数目偏低？ 每克样品中的菌落数 =C（菌落数）* M （稀释倍数）/ V（涂布体积） * * * * 一、微生物培养基的配制 1、培养基定义： 培养基（培养液）是为人工培养微生物而制备的，提供适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。 思考：微生物细胞的元素组成是什么？ 2·类型 （1）按物理状态分：固体培养基、液体培养基、半固体培养基。 区别：加入琼脂的量决定培养基的形态。 熔点：96度 凝固点：40度 注意：一般细菌不能利用琼脂。 应用微生物分离、鉴定、计数和 菌种保存等方面 微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落 用途：纯化、计数、鉴定 液体培养基：工业生产 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 半固体培养基：观察运动 无动力 有动力(弥散) 例、下列叙述不正确的是 A 培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B 液体培养基和固体培养基所含的最基本物质不相同 C 微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 B.C. （2）按成分分：天然培养基、合成 培养基和半合成培养基。 依据：成分是否明确 判断下列培养基按成分属于何种培养基？ 牛肉膏、蛋白胨培养基 葡萄糖铵盐培养基 马铃薯蔗糖