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一、基础知识 微生物: 1.特点:结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. 细菌的构造 基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质(细胞质中核糖体、质粒、贮藏性颗粒等)、拟核。 1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度? 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么? 平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。 ㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 ㈡纯化大肠杆菌: ⑴平板划线法: 1.接种: 二、实验操作 分散成单个细胞, 形成单个菌落 一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的; 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的菌落。 一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的; 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的菌落。 * * 到目前为止, 几十项诺贝尔生理学和医学奖,化学奖 都与微生物有关 2、微生物的类群 原生生物: 真菌: 病毒: 无细胞结构 真核细胞 原核细胞 原核生物: 如酵母菌 如草履虫、单细胞藻类等 图1-3 细菌的结构 特殊结构:鞭毛、荚膜、芽孢等 有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌. 单个 或少数菌体 2.特征: 大小、形状、光泽度、 颜色、透明度等。 3.功能: 1.定义: 菌 落: 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 课题1 微生物的实验室培养 专题2 :微生物的培养与应用 1.何为培养基?不同的培养基有不同的配方,但是其基本成分都相同,都包括哪些营养成分?有何作用?请举例说明。 2.无菌技术包括哪些方面?消毒和灭菌的区别?常用的消毒方法有哪些?常用的灭菌方法有哪些? 自主学习: 培养基和无菌技术 一、基础知识: (一)培养基 培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。 (一)培养基: 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分: 思考:微生物“吃”什么? 碳源、氮源、无机盐、生长因子、水 ⑴碳源 无机碳源: 有机碳源: CO2、NaHCO3 、CaCO3 葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉和纤维素等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源: 有机氮源: 铵盐、硝酸盐等 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注:①微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。 ②含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 不同的微生物往往需要采用不同的培养基 不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 一、基础知识: (一)培养基 (1)按物理状态来分:培养基可分为固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。 (2)按功能来分,可分为选择培养基和鉴别培养基。 (3)按成分来分,可分为天然培养基和合成培养基。 2.培养基的类型 分离导入了目的基因的受体细胞 加入青霉素等抗生素 分离固氮菌 不加氮源 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入青霉素 分离杂交瘤细胞 加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷 分离自养型微生物 不加含碳有机物的无碳培养基 分离金黄色葡萄球菌 加入高浓度食盐 应用 培养基 耐高温需保持干燥的 物品,16
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