2%2c2-联喹啉-4%2c4-二甲酸二钠为共振拉曼和SERRS探针定量检测蛋白质.pdfVIP

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2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠为共振拉曼 和SERRS探针定量检测蛋白质 陈 雷 于 治赵 冰 * 吉林大学超分子结构与材料国家重点实验室,吉林 长春 130012 摘要 建立了一种简单快速的以2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠(BCA)酸做为共振拉曼和表面增强共振拉曼 (SERRS)活性探针检测蛋白质的方法。在这里,蛋白质在碱性的条件下可以将Cu2+还原为Cu+,然后与 BCA形成BCA/Cu+复合物。这种复合物具有很高的共振拉曼和表面增强共振拉曼活性,并且对蛋白质的检 测可以分别达到纳克和皮克量级。通过这种方式建立的以BSA为模型蛋白的标准曲线具有很宽的线性范 围,并且用来鉴别未知蛋白的量与研究蛋白质和蛋白质间的变化。结果表明这种方法拓展了基于试剂技术 的蛋白质检测。该方法操作简单,节约试剂,而且灵敏度很高,在高通量高灵敏度免疫检测领域有很大应用 潜力。 关键词 BCA;共振拉曼;SERRS;定量;蛋白质 QuantitativeEvaluationofProteinswithBicinchoninicAcid:Resonance RamanandSurface-EnhancedResonanceRamanScattering-Based Methods CHEN LeiYU ZhiZHAOBing* KeyLaboratoryforSupramolecularStructureandMaterialsofMinistryofEducation,JilinUniversity,Changchun 130012, China Abstract ArapidandhighlysensitiveBicinchoninicAcid(BCA)reagent-basedproteinquantitativeevaluationwasdevelopedby theuseofthecompetitiveresonanceRaman(RR)andsurface-enhancedresonanceRaman(SERRS)-basedmethods.Herein,RR andSERRSprobe,BCA/Cu+complexwhichwasformedbyreducingthecopperionfromCu2+toCu+inalkalineenvironment withappearanceofprotein.ByusingtheseproposedRRandSERRSmethods,theauthroscoulddetectproteinoveramuchwi derlinerconcentrations.Theirlowerproteindetectionconcentrations(50ng·mL-1and10pg·mL-1)demonstrateditsgreat potentialinhighlysensitiveconcentrationdeterminationofproteinsandproteinmixture.Furthermore,protein-to-proteinvaria tionwasdeterminedbyreferencetoastandardcurvewithknownconcentrationsofBSAinordertoselectanappropriateassay methodfordifferentkindsofproteins.Theproposedmethodscouldbeextendedtotheapplicationofreagent-basedproteinassay techniques. Keywords BCA;ResonanceRaman;SERRS;Quantitativeevaluation

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