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凝胶成像分析系统检测DNA含量的适用范围研究 杜珍武 王 茜 张玉成 吴 玫 刘佳南 张桂珍 (吉林大学中日联谊医院中心实验室，长春130031) 摘 要：目的 探讨利用凝胶成像分析系统进行DNA定量 检测的DNA含量的范围。方法将已知含量的质粒DNA 1 引言 样本稀释成不同含量DNA样本，进行琼脂糖凝胶电泳。利 凝胶成像系统图像分析法是检测DNA含量的 用凝胶成像系统进行结果观察以及图像的采集，利用IM— 一种重要手段。该方法主要根据荧光染料与DNA AGE J软件对DNA的电泳图谱进行灰度分析，利用EXCEL 结合后，经过激发后得到的荧光信号强弱与DNA含 软件对已知含量的DNA的灰度值与含量之间的进行相关性 量有关，含量越高，荧光信号越强，并成一定的比例 分析，建立线性方程。结果DNA含量与DNA电泳各条带 关系。荧光信号强弱可以通过凝胶成像系统得到的 的相同面积内的平均灰度值成线性关系，R2值为0．9742，其 凝胶图片上的DNA电泳条带的灰度值来表示…。 中DNA含量在50一500ng作用与测定的平均灰度值有较高 根据这一特点，在知道已知含量DNA灰度值的情况 的相关性，R2值为0．9979。结论凝胶成像分析系统进行 下，通过测定未知含量的灰度值，二者通过比较后， DNA定量分析检测的DNA含量的范围在50一500ng左右。 就可以知道未知DNA的含量。该方法法由于操作 关键词：DNA含量；凝肢成像分析系统；灰度值 简便、直接、节省DNA分子等特点，得到广泛应用， 特别是在进行少量DNA的测定，如对酶切产物的定 量较为适用。由于灰度值的数量变化在0—255之 The forthe ofDNA study applicaplescopes 间，变化范围较窄。这就需要寻找一个较佳的DNA contentdetected bygelimaginganalysis含量与灰度值相关变化较大的范围，在此范围内，测 system 定的灰度值应与DNA的含量成线性关系，且分辨率 DUZhenwuWANGQianZHANG WUMei 较大。本研究将对这一检测范围进行寻找与探讨。 Yucheng LIUJiananZHANGGuizhen 2试验材料和方法 Research ThirdClinical of ● (Central Department．The college Jilin university，Changchun130033，China) 取已知含量的质粒DNA稀释成968 ng、726ng、