牛奶中链霉素和双氢链霉素残留检测的液相色谱-串联质谱法研究.pdfVIP

第27卷增刊 分析测试学报 V01．27 FENXICESHI ofInstrumental Nov．2008 2008年11月 XUEBAO(JournalAnalysis) 牛奶中链霉素与双氢链霉素残留检测的 液相色谱一串联质谱法研究 孙 雷，张骊，黄耀凌，汪 霞，王树槐 (中国兽医药品监察所，北京100081) 常用于预防和治疗革兰氏阴性菌和结核杆菌等引起的感染。由于其抗菌谱广，而且价格低廉，因此在 奶牛养殖业中常被大量应用于治疗奶牛乳腺炎等。链霉素使用后可对肾脏和耳听神经造成不可逆转的 醛基氢化后所获得的另一种链霉素制剂，其抗菌作用、用法用量均与链霉素相同，但其毒性较链霉素 大，损害耳蜗。人用双氢链霉素已淘汰，但目前还作为兽药使用。欧盟、美国等都对动物源食品中该 类药物的残留极为关注，我国农业部235号公告规定牛奶中链霉素与双氢链霉素残留量之和不能超过 文以牛奶为试材，建立了一种快速简便、专属性强、灵敏度高的LC—MS／MS方法，以保障对该类药 物的确证检测。 1 实验部分 1．1仪器与试剂 UPLC—Quattropremier Toledo公 Acquity 320 司；DeltapH计，MettlerToledo公司；Biofuge CBX小 柱，500mg，J．T．Baker公司。 链霉素、双氢链霉素，纯度均大于99．0％，由中国兽医药品监察所提供；甲醇为色谱纯，Merck 公司；HFBA为优级纯，AcrosOrganics公司；KH：PO。、三氯乙酸、氢氧化钠、盐酸为分析纯；所用水 为超纯水。 10mmol／L mmoL／L KH2P04溶液(含0．4EDTA和2％三氯乙酸)配制：称量2．72gKH2PO。，加入2 mol／L 4．0，再加入0．3 L水，用1 HCl溶液调节pH gNa：EDTA(含2个结晶水)和40g三氯乙酸，混匀。 对照溶液配制：精密称定各对照品适量，置于不同10mL量瓶中，用水溶解并稀释成质量浓度为 ms／L的标准工作液，储备液和工作 l∥L的标准储备液；量取标准储备液适量，再用水逐步稀释成10 液配制完后都转移到塑料试管4℃下保存。 1．2 测定方法 1．2．1 mmx2．1 mmol／L 色谱条件色谱柱为BEHC】8(50 mm，1．7斗m)；流动相A相为20HFBA乙 mmol／L 腈溶液，B相为20 HFBA水溶液；梯度洗脱：0～10min，5％A线性变化至60％A；10—10．1 min，60％A线性变化至5％A；10．1～15min，维持5％A。流速为0．3mL／min；柱温为30oC；进样量 为8斗L。 kV；萃取电压为4．0V；预六极杆电压 1．2．2质谱条件电喷雾离子源(ESI+)；毛细管电压为3．2 oC；脱溶剂气速为650L／h；锥孔反吹气速为50L／h。多 为0．5V；源温为110℃；脱溶剂温度为350 反应监测离子情况见表1。 表1 药物定性、定量离子对、锥孔电压与碰撞能量 ～180— 第11期 分析测试学报 增刊 1．2．3定性与定量该方法定性需满足4个条件：①试剂空白和样品空白不出现与阳性对照相同的 离子峰；②特征离子质量色谱峰信噪