人参养荣汤对衰老肝、脑组织线粒体形态结构保护作用研究.pdfVIP

102 第八次全国中西医结合虚证与老年医学学术研讨会论文集 人参养荣汤对衰老肝、脑组织线粒体形态结构保护作用的研究★ 邓红唐方 天津医科大学总医院中医科(天津300052) 生物能量学认为线粒体在生命活动中具有主要作用，被称为“生物钟…”，故线柱体的老化是细胞衰老的又 ～重要原因”’，伴随增龄线粒体代谢状态的改变伴有形态结构的变化，因此寻找保护和完善线粒体超微结构的药 物也成为抗褒老研究关注的焦点之一。奉实验以亚急性老化鼠为模型”’．通过对不同组别小鼠肝、脑组织线粒体 超微结构衰老变化的观察及形态计量学分析．探索人参养荣汤对亚急性老化鼠线粒体形态结构变化的保护作用。 1材料与方法 1 l 药物人参养荣汤冻结干燥粉末，由日本津村株式会社提供。 1，2试剂D一半乳糖．购自TBD生物中心。 1．3仪器OLYMPUS，BX-60光学显微镜．日本：北航医学匿蒙处理系统，北京tOLYMPUS-VSP-3显微照相系 统，旧奉：透射电镜J删一100SX，由JEOL(口本)生产。 1 4动物ICR系小鼠，3月龄(雌雄各半)．体重20+59。购自中国人民解放军军事医学科学院实验动物中 心。 1．5方法 青年对照组每天注射生理盐水．人参养荣汤实验组用药量分别为每日250mg／kg，375 mg／kg．500=8／蛔．青年 对照组及模型组同等量蒸馏东溢胃。第31天处死小鼠。每组醢机选取6倒，迅速摘取肝小叶和脑皮质．留作电镜 观察。 1．5 随机选取5个视野，将每组各30份图像，扫描存储．通过医学图像分析仪CMIAS系列一多功能真彩色病理圈像分 析系统，进行形态计量学分析。测量时逐幅调出图像．校正定标后。用交互式半自动测量方式测定线粒体平均长 厅爿： 据二维图象Delesse原理，空间体积的测量可简化为二维图像上线长的测盘．蛆求得体密度(v，)．采用正方测试格 法，由图像分析仪采用交互式半自动测盘方式，通过分析所选取的图像读取面数密度，班此反映同等范围内线粒 体数目．为减少测盘误差将10000倍图像，进行8倍扩大冲洗。每组图像随机选取30个完整线粒体截面。目测其 截面内靖舶数目，进行统计学分析·|毫膜面积采用正方格测试法，代入公式： ，∑，。求取比膜面积(6．)． J=：．-eL ‘∑L for 1．6统计学处理采用Spss window统计软件处理．实验数据rAx+S表示，行多组间样本均数比较，采 用方差分析，PO，05认为有统计学意义． 2结果 2．1线粒体超微结构观察青年对照组肝、脑细胞线粒体丰富。大小均匀．嵴较多，清晰且捧列整齐；模型 组线粒体数目减少，体积增大、变圆、有的出现空泡．嵴变短变少．方向不规剐，有的嵴断裂消失．不同剂量中 药组线粒体超微结构明显改普．其中高浓度中药组与青年对照组相近． 2．2 线粒体形态计盘学测定 2．2．I 线粒体比表面积与青年对照组相比横型组6值有意降低(P0．01)。显示模型鼠肝细胞线粒体有 意扩张．与模型鼠相对R20组比表面积的增大(PO．05)，具有显著的统计学差异．结果见表l。 注：‘天津市自然科学基金资助项目 笙垒姿全曼主亘墨堕鱼壅垩兰耋兰垦兰堂查堕盟全笙奎叁 !竺 表1 备实验组小鼠肝啦线粒体比表面积比较x+S，n=30) N 30 0，13士0．04 C 30 0．09±0041 RIO 30 0．10±0．04‘