三种卤代荧光素和牛血清白蛋白结合的研究.pdfVIP

第30卷专辑 南昌大学学报(理科版) V01．30 Suppl 2006年9月 JournalofNanchangUniversity(NaturalScience) Sept．2006 文章编号：1006一0464(2006)专辑一1041—02 三种卤代荧光素与牛血清白蛋白结合的研究 李建晴1”，郭彦青1”，卫艳丽1，董川1 (1．山西大学化学化工学院，山西太原030006；2．晋中学院。山西晋中030600) 摘要：用荧光光谱法研究了水溶液中二碘荧光素、四溴荧光素、四氯四溴荧光素三种卤代荧光素与牛血清白蛋白 论，求算了给体(BSA)受体(染料)间的距离和能量转移效率。 关键词：卤代荧光素；牛血清白蛋白；给体与受体 中圈分类号：0657．39 文献标识码：A 牛白蛋白(BSA)是主要的血清蛋白，它能和许室温下测定其荧光光谱或吸收光谱。 多内源、外源性物质结合…。一些小分子染料与蛋 2结果与讨结论 白质结合，可引起染料或蛋白质光谱特性的变化，因 此可作为蛋白质的探针心J，从而可以从分子水平的 2．1 三种荧光素对BSA荧光的影响 角度认识蛋白质与小分子相互作用机理。 2．1．1对BSA荧光猝灭的机理 二碘荧光素(diiodofluorescein，DIF)、四溴荧光 X 素(Tetrabromofluorescein，TBF)、四氯四溴荧光素度(分别为0、1、2、3、4、6、810一mol／L)，扫描 (Tetrachlorotetrabromofluorescein，’rrF)这类化合物荧光光谱。结果表明，随着染料浓度的增加，BSA的 在结构上的特殊性导致了它们的理化性质具有某些 荧光逐步被猝灭，说明染料和BSA发生了相互作 特性。在光度分析中已用于金属离子的测定、有机 用。荧光猝灭符合Stem—Volmer猝灭方程¨】： 分子、蛋白质研究领域∞1。本文研究了它们和BSA (1) Fo／F=1+Ksv[Q]=1+toK。[Q] 的相互作用，探讨了它们对BSA荧光的猝灭机理， 由猝灭曲线的斜率求得常数K。结果见表1。 测得了它们和BSA的结合常数、结合位点数。根据 2．1．2结合常数和结合位点数的测定 F6rster非辐射能量转移理论，求算了给体(BSA)受荧光强度与猝灭剂的关系可由荧光分子与猝灭 体(染料)间的距离及能量转移效率。 。 剂分子之间的结合常数表达式推导求出…。设生 物大分子B有n个相同且独立的结合位点，则其与 l 实验部分 小分子问的猝灭反应可表示为： 1．1仪器与试剂 nQ+B=QnB，其结合常数为K．， 日立F一4500型荧光分光光度计(HITACHI)； K．=[Q。B]／[Q]4[B](2)结果见表I。 2．2 荧光素：Merk产品，用二次水配制成1×10q pH对染料与BSA相互作用的影响 mol／L储备溶液，使用时适当稀释； 牛血清白蛋白(BSA)：国药集团化学试剂有限与BSA相互作用的影响，结果见表l。 x 公司产品，用二次水配制成l 10。4mol／L储备溶2．3染料与BSA作用距离的计算 液，使用时适当稀释；Britton—R