舒洛地特对糖尿病肾病大鼠肾脏HPA%2cb-FGF表达与影响.pdf

摘要 舒洛地特对糖尿病肾病大鼠肾脏HPA，b．FGF表达的影响 研究生杜江涛 导师王建生 郑州大学第二附属医院肾内科 河南郑州450014 摘 要 背景与目的 ． 微量蛋白尿的出现，在糖尿病患者中意味着糖尿病肾病(DN)的到来，蛋白 尿不仅是DN的临床表现，更是加速其进展的主要原因。由多孔的内皮细胞、肾 小球基底膜(GBM)、足细胞及其相邻足突之间的裂孔隔膜共同构成肾小球滤过膜 的机械和电荷屏障，在蛋白尿的形成中起着重要作用。硫酸乙酰肝素蛋白聚糖 分布，破坏GBM的电荷屏障使滤过功能受损。DN的发病机制，除了公认的高 脂高糖、肾小球高血流动力学、肾素．肾素血管紧张素系统的激活、氧自由基的 损伤及非酶糖激化作用等影响因素外，近年来有学者发现，在有微量蛋白尿的 DN患者的的尿液中检测到伴随有HPA、HS的出现，进一步研究发现，在DN 患者的肾脏组织GBM中有HPA的高表达伴随基底膜HS染色减少，DN蛋白尿 的形成是否与肾脏组织蛋白HPA的表达有关，成为近年来研究的热点。 肾病大鼠肾组织的表达，进一步探讨蛋白尿发生的机制，并用舒洛地特干预， 通过生化、逆转录聚合酶链反应、免疫组织化学等一系列检测方法，进而阐明 舒洛地特的作用机制，为其在减少DN蛋白尿方面的临床应用提供理论依据。 方法 4周龄SD雄性大鼠70只，适应性喂养一周，随机分为对照组(n=20)和DN 摘要 照组尿量的1．5倍，是为造模成功。对照组等剂量腹腔注射链脲佐菌素缓冲液。 型组按等剂量生理盐水腹腔注射共8周。实验期间，动物自由饮食饮水，未使 用胰岛素及其他降糖药。4周末及8周末每组分别处死10只大鼠。测定24h尿 蛋白定量及血生化指标；取肾脏，行肾组织病理学检查，采用逆转录聚合酶链 反应、免疫组织化学技术检测HPA在肾脏组织表达：免疫组织化学方法检测 b．FGF在肾脏组织的表达。 结果 1．模型组、治疗组24h尿蛋白排泄量在4周末及8周末均较对照组明显升高 (尸O．05)，治疗组尿蛋白排泄量较模型组明显降低(P0．05)；模型组血清白蛋 白水平在4周末及8周末均较对照组、治疗组明显降低俾0．05)，治疗组血 清白蛋白水平在4周末及8周末与对照组相比，差异无统计学意义；模型组、 治疗组大鼠肾比重(肾重／体重)较对照组明显升高(P0．05)，治疗组大鼠肾比 重较模型组明显降低(氏0．05)；模型组大鼠血Cys．C水平较治疗组、对照组 明显升高(尸O．05)，治疗组血Cys．C水平与对照组相比，差异无统计学意义。 2．大鼠肾组织的病理学改变：对照组肾脏组织病理大致正常；4周末，模型组 可见肾比重、肾小球体积明显增大，细胞外基质增多，基底膜增厚，延续至 8周末出现肾小球硬化、肾间质纤维化；治疗组与模型组相比，肾脏组织病 理改变明显减轻。 3．逆转录聚合链反应结果示：HPAmRNA在对照组大鼠肾脏有微弱的表达， mRNA 模型组4周末有较高的表达，并持续至8周末，治疗组4、8周末HPA 表达较模型组明显降低。 4．免疫组化结果：对照组中，HPA、b．FGF在肾小球、肾小管间质均有弱的表 达，模型组4周末HPA、b．FGF在肾组织的表达明显升高，并一直延续至8 周末；治疗组HPA、b．FGF在肾组织的表达较模型组明显降低(尸O．05)。 结论 1．随着链脲佐菌素DN进展，大鼠肾小球、肾小管肾间质HPA、b-FGF表达显著 升高，提示HPA、b．FGF表达升高可能是链脲佐菌素DN大鼠尿蛋白产生的重 要因素之一。 2．舒洛地特干预后，DN大鼠尿蛋白明显减少，其作用机制可能与下调肾组织 摘要 HPA、b．FGF的表达有关。