胃癌顺铂耐药细胞株的建立和基因表达谱分析.pdfVIP

·3l· ·胃夕卜科· 胃癌顺铂耐药细胞株的建立和 基因表达谱分析 李大卫彭志海吴睛王静珏杨海燕 【摘要】 目的建立人胃癌顺铂耐药细胞株，探讨其基因表达谱与顺铂耐药的相关性。方法 采用浓度梯度递增法诱导胃癌SGC7901细胞株，建立对顺铂耐药的SGC7901／DDP细胞株。应用 Plus Affymetrix基因芯片HG—U1332．0筛选SGC7901和SGC7901／DDP的耐药相关的差异基因。结 果建立可耐受1．0ms／LJI哽铂浓度的耐药株SGC7901／DDP，耐药指数22．85。应用电镜观察其形态 学变化，细胞计数法绘制生长曲线，噻唑蓝(MTF)检测检测药物敏感性，流式细胞术分析细胞周期。 利用基因芯片筛选得到在耐药细胞株和敏感株中表达差异大于10倍的基因共107条，其中JNKl 和JNK2为与耐药相关的明显上调基因。Westernblot证实JNK的磷酸化活性形式P—JNK在耐药株 中表达明显升高。SP600125抑制P—JNK表达后耐药蛋白P-gP表达明显减低。结论高通量的基 因芯片筛选得到大量有意义的与顺铂耐药相关的差异基因，P—JNK可成为逆转耐药的新的靶点。 【关键词】 胃肿瘤；基因芯片；多药耐药 cancercelllineSGC790land EstablishmentofDDP．resistant Ⅱ gastric geneproffieanalysis General First Da—wei，PENG劢i—hai，WUQing，eta1．Departmentof Surgery，ShanghaiPeople’s Hospital， ShanghaiJiaotongUniversity，Shanghai200080，China author：WUQing Corresponding Toestablish human cancercelllineand 【Abstract]0bjectivecis‘platin(DDP)一resistantgastric andDDP the betweendifferential resistance．MethodsADDP．resist． investigaterelationship geneprofile anthuman cancercelllineSGC7901／DDPWasestablished doseofDDPto1．O gastric byincreasing up andtheresistance 22．85．’111e Wastested index(m)Wasmuhidrug mg／L resistance(MDR)phenotype cell electron cell u． bydetectingmorphologyusing microscopy，drugsensitivityusingMrI-Iarray．and cycle flow 107 were were morethan