三维培养-传统的细胞培养技术是二维培养模式,改变了细胞原来在体内的生存环境.docVIP

三维培养-传统的细胞培养技术是二维培养模式，改变了细胞原来在体内的生存环境 三维培养-传统的细胞培养技术是二维培养模式，改变了细胞原来在体内的生存环境。而三维细胞培养技术是在体外细胞培养过程中，为细胞提供一个更加接近体内生存条件的微环境。文中提到的球形培养是一种常见的三维培养模式。 学术术语来源--- 脂肪干细胞的三维球形培养 文章亮点： 1 首次应用3种不同的三维球形培养方法：低黏附培养法、hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法，对人脂肪干细胞进行体外培养，以模拟细胞在体内的生存状态，还原大多哺乳类细胞在正常生理状态下的三维结构，并对这3种方法进行独立试验以及比较分析。 2 自创Eppendorf管培养法，利用Eppendorf管对脂肪干细胞进行三维球形培养，结果显示此方法可以产生活力较好，大小均一且较大的球形细胞，并具有操作简单，成本低廉，可大规模实行等优点。 3 利用Eppendorf管在体外对人脂肪干细胞进行三维球形培养中，发现了一个比较有趣新颖的现象，细胞团在进行贴壁培养过程中会出现极性生长现象，即单侧先出现细胞贴壁生长的趋势。 关键词： 干细胞|脂肪干细胞|诱导分化|球形培养|活力|低黏附培养|hanging-drop培养|Eppendorf管培养|国家自然科学基金 主题词： 干细胞；脂肪组织；细胞培养技术；球形体, 细胞 ? ? 摘要 背景：大多哺乳类细胞在正常生理状态下多以三维结构存在，为还原细胞本身在体内的自然状态，很多研究者开始尝试在体外对细胞进行三维培养，球形培养是一种常见的三维培养模式。 目的：尝试用3种不同的方法在体外对人脂肪干细胞进行球形培养，并观察其生物学特征。 方法：对提取的脂肪来源细胞进行表面Marker流式检测以及成脂成骨诱导鉴定后，证实为脂肪干细胞。先后用低黏附培养法、hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法3种方法在体外对脂肪干细胞进行球形培养，对3种方法形成球形的特点进行比较分析，并通过Imagej软件计算出3组多细胞球体的平均面积，利用Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Live Dead Cells试剂盒对3组多细胞球体进行活力检测。 结果与结论：①通过流式细胞术鉴定细胞表型标志物，其中CD29，CD44，CD59完全阳性，同时成脂成骨诱导也为阳性，证实提取的细胞为脂肪干细胞。3代以内脂肪干细胞多呈长梭形，并克隆状生长。②低黏附培养法、hanging-drop培养法、Eppendorf管培养法均可使脂肪干细胞聚集成球形生长，但所成多细胞球形有所差异。低黏附培养法所形成的细胞球形大小不一，不易控制；而hanging-drop培养法和Eppendorf管培养法均可使脂肪干细胞形成大小均一的球形，但在大小和形成时间上有所不同。③3种不同方法所形成的球形细胞均保持较好的细胞活力。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程