应用SSR技术对西瓜种子进行品种纯度鉴定的研究.pdfVIP

维普资讯 应用 SSR技术对西瓜种子 进行 品种纯度鉴定 的研 究 田 雷 贾希海 彭瑞迪 律宝春 吴明生 王 辉 云晓敏 (北京市种子管理站 100088) 摘 要：本试验以4个西瓜杂交种和8个亲本为试验材料，建立了西瓜单粒干种子DNA快速提取 方法，筛选出了能够区分4个杂交种与双亲，并具有互补带型的SSR引物，建立了适于SSR分子标记 检测西瓜种子品种纯度的反应体系。试验结果证明，这套检测技术体系可用于西瓜杂交种品种纯度室 内快速鉴定，从而为SSR分子标记技术在西瓜种子纯度鉴定中的应用和推广打下了坚实的基础。 关键词 ：西瓜 ；杂交种；DNA提取 ；SSR引物；纯度鉴定 Abstract：Theexperimenttakesfourhybridwatermelonvarietiesandeightparentlinesasmaterial，founds afasttrackDNA extractmethodforsingledrywatermelonseed，andscreensoutcomplementary—linedSSR primerscapableofdistinguishingthe’fourhybridvarietiesandtheparentallinesandestablishareactionsystem fitofrpurityidentificationofwatermelonvarietieswithSSRMarking．Theexperimentprovesthatthecheckand testsystem couldbeutilizedforfasttrackindooridentificationofvarietypurityofhybridwatermelon，layinga soundfoundationofrtheapplicationandextensionSSRMarkinginwatermelonseedpurityidentification。 KeyWords：Watermelon；Hybrid；DNAExtract；SSRPrimer；PurityIdentification 西瓜是葫芦科葫芦属一年生草本植物，栽培历史 可有效区分母本与杂交种 。但RAPD标记的主要缺 悠久，地域广，深受人们的喜爱，素有 夏“季水果之 点是多数位点的标记带表现为显性，不能有效区别杂 王”的美誉。同时也是北京市指定的主要农作物之 交种和双亲。SSR技术，以PCR为基础，具有信息含 一 ， 在京郊农业生产和农民创收中起着重要作用。种 量高、呈共显性遗传、易于分析等特点，可用来高效 子纯度是种子质量的主要指标，种子纯度的降低会明 准确地检测生物体中的遗传变异。该项研究旨在以 显降低作物的产量和产品品质。在西瓜种子生产和销 SSR分子标记为技术手段 ，探索适合室内西瓜种子纯 售过程中，由于忽视种子真实性和品种纯度检验，假 度 的快速鉴定方法。 冒伪劣种子案件时有发生，给农业生产造成了不可弥 补的损失。因此，对西瓜杂交种子纯度进行快速 、准 1 材料和方法 确、有效地鉴定显得十分必要，也是我们种子管理部 门义不容辞的责任和义务。它对于我们提高种子管理 1．1 植物材料 的执法力度，严厉打击假冒伪劣种子具有很重要的现 本实验中所用到的12个西瓜材料 (包括黄晶1号、 实意义。目前，西瓜杂交种纯度鉴定的直接可靠的方 永丰 1号、暑宝、红小帅4个杂交种和各 自的亲本)由 法是田间小区种植鉴定，但这一方法易受环境的影响， 北京市农业技术推广中心曾雄同志提供。上述4个西 时间长且费工占地。近年来，种子生化鉴定技术的应 瓜组合均为 目前西瓜生产上大面积推广使用的杂交种， 用对种子纯度检验的准确性、快速性和实用性起了很 代表了早熟、晚熟、无籽和袖珍西瓜4个栽培类型。样 大推动作用，国内外曾有学者利用同工酶和蛋白质电 品材料为西瓜种子。 泳图谱的鉴定技术对西瓜杂交种进行研究，但由于同 1．2 研究方法 工酶位点及蛋白质种类有限，存在组织特异性和可利 1．2。1 基 因组 DNA提取 用位点有限，针对性强等限制因素，对亲缘关系很近 1．2．1．