温度和溶菌酶敏感菌株L_谷氨酸合成.pdfVIP

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2009 15 6 ): 840~845 2009-12-25 应用与环境生物学报 , ( Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X DOI: 10.3724/SP.J.1145.2009.00840 温度和溶菌酶敏感菌株的L-谷氨酸合成 1 2 2* 余秉琦 沈 微 诸葛健 1 (江苏工业学院化学化工学院生物工程与制药系 常州 213164) 2江南大学工业生物技术教育部重点实验室 无锡 214122) ( 摘 要 用温度敏感型菌株发酵生产L -谷氨酸不存在生物素亚适量问题 , 因此该方法在国际上被广泛使用. 通常采用 对出发菌株进行传统诱变的方法获得温度敏感型菌株 . 以谷氨酸棒杆菌CICC 10226为出发菌株,先克隆其ltsA基因, 然后通过基因敲除的方法构建了突变菌株 Corynebacterium glutamicum WT ⊿L ,该菌株同时具有温度敏感性和溶菌 酶敏感性 . 经透射式电子显微镜观察发现,于38 ℃培养的突变株细胞与在30 ℃培养的同一种细胞相比,细胞明显增 大,而出发菌株无该现象 . 发酵试验表明,在生物素过量的情况下,在发酵进入细胞产酸期后通过将发酵温度从原来 的30 ℃提高到38 ℃,温度敏感突变株的产酸量增加近5倍. 如果在发酵培养基中添加适量的琥珀酸和乙酸,该菌株与 不添加的在30 ℃培养的对照相比,产酸量增加近6.5倍. 对于野生型出发菌株而言,在生物素过量的情况下,无论是否 采用变温发酵方法都几乎不产酸 . 说明温度敏感突变株即使在生物素过量的情况下也能通过变温发酵诱导其合成并 分泌产生L -谷氨酸 . 图10 表 1 参 13 关键词 谷氨酸棒杆菌;L -谷氨酸;温度敏感性;溶菌酶敏感性;变温发酵 CLC Q936 : TQ922.1 L-glutamate Production by Engineering Strain with Temperature and Lysozyme Sensitivity 1 2 2* YU Bingqi , SHEN Wei ZHUGE Jian 1 ( Biotechnology and Pharmaceutical Department, Chemistry and Chemical Engineering Institute, Jiangsu Polytechnic University, Changzhou 213164, China) (2Key Laboratory of Industrial Biotechnology of Ministry of Education, Southern Yangtze University, Wuxi 214122, China) Abstract The glutamate excreters obviously possess special pro

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