RASSF1A基因转染对人肺腺癌细胞株 A549增殖的抑制作用.pdfVIP

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RASSF1A基因转染对人肺腺癌细胞株 A549增殖的抑制作用.pdf

( ) 中南大学学报 医学版  2005, 30 (2) ( ) J Cen t S ou th Un iv M ed S ci 193 ① RASSF1A 基因转染对人肺腺癌细胞株 A549增殖的抑制作用 邓征浩 ,周建华 ,曹慧秋 ,沈  明 ,文继舫 (中南大学湘雅医学院病理学教研室 ,长沙 4 10078) κ [摘要 ]  目的:观察外源性 RA SS F 1A 基因对人肺腺癌细胞 A 549 增殖及 N F B 亚单位 P65 表达的影响 。方 法 :利用脂质体转染技术将真核表达重组体 p cDNA 3. 0RA SSF1A 质粒和空载体 p cDNA 3. 0 质粒分别导入 A 549 细 ( ) 胞 ,经 G4 18筛选后获得稳定转染细胞克隆 ,W e stern b lotting检测 RA SSF 1A 基因表达 。采用 M TT 四甲基偶氮唑盐 法 、流式细胞仪分析转染细胞的生物学行为 。R TPCR 和 W estern b lotting检测基因转染对 P65表达的影响 。结果 : 经脂质体转染和筛选 ,建立了稳定表达 RA SS F 1A 基因的 A 549 细胞系 。与未转染组和转染空白载体组比较 ,转染 ( ) ( ) RA SSF 1A 基因的细胞生长速度明显减慢 P 0. 05 ,细胞周期中 G / G 期比例明显增加 P 0. 05 ,而 S期比例减 1 0 ( ) 少 ;转染组细胞核内 P65 蛋白表达明显降低 P 0. 05 ,而全细胞 P65 蛋白及 mRNA 表达未见明显变化 。结论 : RA SSF 1A 基因可能通过抑制 P65活性而抑制人肺腺癌细胞 A 549 的生长 。 [关键词 ]   RA SSF1A ;  肺腺癌 ;  A 549;  P65 [中图分类号 ]  R730. 5; Q785   [文献标识码 ]  A    [文章编号 ] (2005) 02 0 19304 Prolifera tion inh ib ition of hum an lung adenocarc inom a cell line A 549 tran sfected by RA SSF 1A gene

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