微生物的基本实验技能.docVIP

微生物的基本实验技能 几个基本概念： 培养物（culture）：在微生物学中，把在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体成为培养物。 纯培养物（pure culture）：只有一种微生物的培养物称为纯培养物。 无菌技术（aseptic technique）：指在分离、转接及培养纯培养物时，防止其被其他微生物污染的技术被称为无菌技术。 培养基（culture medium）：指培养微生物的营养物质。 菌落（colony）：单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体，称为菌落。 菌苔（lawn）：当固体培养基表面众多菌落连成一片时便形成菌苔。 第一部分 微生物的分离与培养 无菌技术 微生物常用器具及其灭菌：（消毒，灭菌和除菌的区别） 器具：试管，三角瓶，培养平皿，移液管或移液枪； 方法：干热灭菌（烧灼灭菌和干烤灭菌），湿热灭菌（高压蒸汽灭菌、间歇灭菌法、煮沸消毒法和流通蒸汽灭菌法），辐射灭菌（紫外线和钴60射线），化学灭菌（来苏水、新洁而灭、甲醛和乙醇等），过滤除菌（蔡氏过滤器、微孔滤膜过滤器），超速离心除菌。 接种操作： 试管斜面接种、穿刺接种、平板划线接种和平板涂布接种。 用固体培养基分离纯培养 稀释倒平板法（pour plate methed）； （2）涂布平板法（spread plate method）； （3） 平板划线分离法（streak plate method）； （4）稀释摇管法（dilution shake culture method） 用于液体培养基分离纯培养 稀释法（主要用于一些细胞大的细菌、原生动物和藻类） 单细胞（单孢子）分离 采用显微分离法从混杂在群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养，称为单细胞（单孢子）分离法。（需要仪器设备，解剖显微镜、显微操作仪，毛细管，显微针、钩、环等。） 选择培养分离 利用选择培养基进行直接分离 如透明圈法（乳酸菌、菊粉酶、蛋白酶等），马丁氏培养基，伊红美兰琼脂培养基。 2．富集培养 二元培养物 微生物的保藏技术 第二部分 显微镜和显微技术