加味四君子汤对小鼠肠道免疫功能调整作用的研究论文.pdfVIP

论文集 ·307· 加味四君子汤对小鼠肠道免疫功能调整作用的研究 张燕1’2 罗予2+ 1．郑州大学；2．河南省医药科学研究院 【摘要】目的：观察加味四君子汤和思密达对小鼠肠道免疫功能的调整作用．方法：盐酸林可霉素灌胃建立小 鼠肠道茵群失调及免疫功能紊乱模型。昆明种鼠随机分6组，正常对照组、自然恢复组、造模组、思密达组、加味四 君子汤组和两药合用组，分别进行肠道茵群检测、小肠黏液中8IgA的测定、血清中IL一2的测定及肠通透性(尿液 中乳果糖与甘露醇比值)的检测。结果：盐酸林可霉素灌胃3天小鼠，肠道茵群失调、slgA从正常对照组的 14．54mg／ml增加到18．70 较，加味四君子汤和思密达合用组优于加味四君子汤组和思密达组。结论：加味四君子汤和思密达均能修复受损黏 膜、有调节肠道免疫功能的作用，但加味四君子汤在调整失调的茵群方面优于思密迭，两药合用给药则能起到最佳 效果。 【关键词】肠道菌群；加味四君子汤；肠道免疫；肠通透性 正常肠道屏障功能依赖于肠黏膜上皮屏障，肠道免疫系统以及肠道的正常微生物的平衡…。近 年来，很多学者开始研究四君子汤对肠道菌群的调整作用，鞠宝玲、李俭等旧。3o研究表明四君子汤 可以改善脾虚大鼠胃肠黏膜的异常形态，使其恢复正常，并对双歧杆菌和乳酸杆菌有明显的增菌作 用，从而调节肠道菌群失调，治疗由肠道菌群失调导致的一系列疾病，李莉M1等研究了加味四君子 汤对肠道菌群失调小鼠的调整作用，效果显著。本文探讨山药加于四君子汤对肠道菌群的调整及机 体免疫功能的调整作用。 l材料 1．1 动物清洁级昆明种小鼠(合格证号：SCXK 省实验动物中心提供。 博福一益普生制药有限公司，批号：S0293；中药：人参、山药、白术、茯苓、甘草，购于张仲景大 药房，将上述中药按2：2：2：2：1混合，水提取，过滤浓缩至lg／ml生药量；生理盐水，山东鲁抗辰欣 药业有限公司；乳果糖(辽宁省丹东市康复制药厂)；甘露醇(北京化工厂，进口分装)；甲基甘露 (乳酸杆菌选择性培养基)；BD(类杆菌选择性培养基)；Bib(双歧杆菌选择性培养基)，培养基的 配制参考文献。 Model GC 1．4主要仪器设备酶标仪(BIO—RAD680)；气相色谱(FULI979011)配有FID检测 X 器，微机色谱数据处理系统SE一54，15m×0．53m0．5斗m毛细管柱。色谱分析条件：SE一54， 280℃，速率15。C／min，保持6 rain，燃气(氢气)30ml／min，助燃空气300ml／min． 2方法 2．1 动物分组、造模‘31及给药方法昆明种小鼠72只，体重18～229，雌雄各半。随机取出12只 ·308· 第十届全国微生态学学术会议 常对照组灌等量生理盐水。随机取出12只作为模型组，立即处死，进行各种指标检测。然后将剩余 的48只随机分为4组，分别灌以生理盐水、思密达、加味四君子汤、及两药合用。中药组和生理盐 水组，每次0．3ml，每日2次，连续6天；思密达组(0．06g／m1)，每次0．2ml，每日2次，连续10 天。各治疗组及正常对照组给药完成后处死小鼠，采集标本进行各种指标检测。 2．2肠道菌群检测无菌采取小鼠鲜粪便约0．29于灭菌后带玻璃珠的青霉素小瓶，加灭菌生理盐 水制成10倍的稀释度，震荡使之均质化，递10倍稀释至10～，取25“1分别接种在各类选择性培养 培养基和BD培养基放入厌氧环境35℃培养48～72h之后计数【5]。根据菌落形态，涂片分析及耐氧 实验结果计算各菌群每克粪便中菌落形成单位(CFU／g)。 2．3 小肠粘液SIgA测定取紧靠回盲部小肠肠段4cm，平铺于滤纸上，纵向剖开刮取肠道内容物及 粘液于EP管中，加入1ml 粘液SIgA的测定，在450nm处读取相应的A值。 2．4 取血清置于一80摄氏度冰箱中保存，按试剂盒说明书进行血清IL一2的测定。 2．5 L／M的测定旧。1将乳果糖200 mg，甘露醇100mg加入lOml生理盐水中配成混合溶液，以