73例中国人血友病甲基因突变的分析_Characterizatin_of_Genetic_Defects_in_73_Cases_of_Haemophi.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)20(1):1一61998 ·适 传 快 报 · 73例中国人血友病甲基因突变的分析① 刘建湘 张宇舟② 王鸿利 黄秋花 曹文俊 王学锋 邵慧珍 王振义 陈 竺 黄 薇 上（海第二医科大学附属瑞金医院，上海血液学研究所，上海 200025) 摘 要 我们用Southernblotting,PCR、变性梯度凝胶电泳D（GGE）和DNAXg序等方法对73例血友 病甲患者经（上海瑞金医院测定血浆FYIQ:C和vWF:Ag诊断，其中无亲缘关系患者 “例，按FYIII:C 水平分为轻、中、重三型。FVIQ:C2％为重型，共47例；FYIII:C 2％一5％为中型，共9例；FU III:C5%-25％为轻型，共 17例）进行FYIII基因突变检测。共检出内含子22倒位23例，均为重型，约 占重型的49%，与国外报道相似。余下50例 其（中无亲缘关系者45)用PCR-DGGE分析所有外显子 及其侧翼内含子序列，发现异常条带则进行DNA测序。在 17例患者中检出突变13种，其中无义突变 5种，均为重型；错义突变 6种，除 1例外都是轻中型；小缺失 2例，都是重型；其中， AA466Lys(AAG)-Thr(ACG), 719Tyr(TAC)-Stop(TAG), AA826Asp(GAC)-Glu(GAA), 312I1e(ATC)-xxC及AA1551-1552de1(AGAA)为新发现的突变。有亲缘关系的患者都有相同的基因突 变，而在无亲缘关系患者未发现相同突变。 基因突变与临床表现基本相符。 关键词 血友病甲，基因突变，Southernblotting，变性梯度凝胶电泳D（GGE),DNA测序 中图分类号Q39,R545 CharacterizationofGeneticDefectsin73Cases ofHaemophiliaAofChineseOrigin LIUJianxiang ZHANGYuzhou WANGHongh HUANGQiuhua CAOWenjun WANGXuefeng SHAOHuizhen WANGZhenyiCHENZhu HANGWei (ShanghaiInstituteofHematology,RuiJinHospital, ShanghaiSecondMedicalUniversity,Shanghai200025) AbstractWeuseSouthernblotting,PCR,denaturinggradientgelelectrophoresis(DGGE)andDNAse- quencingtodetectgenemutationsofhaemophiliaAniChniesepopulation.73cases(47severe(FYIII C＜2%),9moderate(FYIII：C2％一5%),17mild(FVIII：C5％一25%))ofhaemophiliaAwerefirstscr- eenedwithSouthernblotting,23werefoundtobetheintron22niversiontype,allbeingseverecases.The ①本课题受国家自然科学基金、卫生部青年基金及上海血液学研究所胡应洲奖励基金资助。 ②刘建湘、张宇舟为并列第一作者。刘建湘，男，33岁，博士，专业方向为内科血液学；张宇舟，男，27岁，硕士研究生， 专业方向为分子遗传学。 2 遗 传 HEREDITAS(Beijing)1998 20卷 remaining50caseswithoutintron22inversionwereexaminedwithPCR-DGGE.GenomicDNAwere amplifiedusingGC-clampedprimerscovernigalltheexonsandallflankingintronregions.Abnormal bandsweresequenced.13d